Desenvolvimento e validação de método para determinação do perfil graxo do biodiesel de Tungue e Blendas com soja empregando GC-MS

No Brasil o biodiesel é utilizado em misturas com óleo diesel em proporções de 5%, sem que haja modificações nos motores. Com o intuito de diversificar a utilização de oleaginosas não comestíveis no ramo dos biocombustíveis, e ainda vincular a produção com agricultura sustentável, uma alternativa para o RS é a utilização do óleo de tungue para a produção de biodiesel. A caracterização e quantificação de ácidos graxos do biodiesel de tungue, torna-se importante devido à seu exclusivo perfil graxo. Neste trabalho, foi estudado o desenvolvimento e validação de método para a determinação do perfil graxo do biodiesel metílico de tungue e blendas com soja utilizando GC-MS. Os parâmetros de validação considerados foram: curva analítica, linearidade, seletividade, limite de detecção e quantificação, robustez, precisão e exatidão. Para determinar as melhores condições cromatográficas, foram testadas diferentes programações de temperatura no forno cromatográfico; fluxo de gás; temperatura do injetor, detector e interface; e modo de injeção. As condições do GCMS após a otimização foram: injeção de 1 µL com injeção em alta pressão (300 kPa), T do injetor: 250 ºC, injeção split 1:30, fluxo de 1 mL min-1, coluna Rtx-5MS com dimensões 30 m x 0,25 mm x 0,25 µm, T forno: isoterma de 2 min a 130 ºC, aumento de 20 ºC/min até 220 ºC, aumento de 0,5ºC/min até 223ºC, aumento de 7 ºC/min até 250 ºC e isoterma em 250 ºC por 3 min, resultando em 20 min de análise. A temperatura da fonte e interface foram de 200 ºC e 250 ºC, respectivamente, com o MS no modo full scan, ionização por impacto eletrônico a 70 eV, e intervalo de massas de 30 a 500 u.m.a. A identificação do α-eleosteárico foi baseada na fragmentação característica do composto, pela comparação com o espectro do ácido linolênico, e ainda pelo tempo de retenção do composto. Na validação, as curvas analíticas apresentaram valores de r maiores que 0,99. O LD e LQ foram adequados, permitindo a quantificação de ésteres na concentração mínima de 0,6%. Os valores de exatidão ficaram entre 86 e 117%, com RSD% menores que 8%. O efeito matriz também foi avaliado, sendo que esse efeito foi considerado médio para a maioria dos compostos, ficando entre ± 20 e 50%. Durante a aplicação do método, o mesmo se mostrou adequado para amostras de biodiesel metílico de tungue e blendas com soja, nas proporções de 15:85, 20:80 e 25:75 (T:S, v/v). A aplicabilidade do método também foi testada para o biodiesel de soja, obtendo resultados satisfatórios, mostrando-se assim, além de tudo, ser um método robusto.

Síntese de ésteres graxos de chlorella sp. utilizando os processos de extração-transesterificação e transesterificação in situ

Este trabalho teve como objetivo realizar estudo comparativo dos processos de extração-transesterificação e transesterificação in situ para a síntese de ésteres metílicos e etílicos a partir da microalga Chlorella sp. Utilizando o processo de extração-transesterificação, a extração dos lipídeos foi realizada a partir da biomassa seca de Chlorella sp., pelo uso de três diferentes solventes, clorofórmio:metanol, etanol e metanol, sendo o maior rendimento, 12,3%, obtido com a mistura clorofórmio:metanol (2:1 v/v). Independente do solvente extrator utilizado, as frações lipídicas obtidas apresentaram altos índices de acidez que variaram de 39,39 a 112,76 mg KOH/g. Após, os ésteres alquilicos graxos foram obtidos através da transesterificação das frações lipídicas realizada com metanol e etanol (razão molar álcool:extrato lipidico, 30:1) na presença de 10% de H2SO4 como catalisador a temperatura de 100 oC por 4h. A transesterificação in situ (alcoolise direta) aplicada a biomassa de Chlorella sp, foi realizada a 60 e 100 oC por 4 h usando 20% de H2SO4 com base na biomassa seca. A reação foi realizada a partir de 50 g de biomassa seca na presença de 150 mL de álcool (etanol ou metanol) A partir do método de transesterificação in situ foram obtidos maiores rendimentos de ésteres alquilicos graxos (11,0%), quando comparado ao processo de extração-transesterificação (8,1%). Os produtos purificados apresentaram teores de ésteres que variaram de 75,4% a 99,8%. A variação da temperatura de reação da transesterificação in situ não teve influência significativa nos rendimentos dos produtos.

Síntese de novos N-acilaminoácidos graxos: estudo das propriedades gelificantes

Neste trabalho é descrita a síntese de novos N-acilaminoácidos e Nacilaminoésteres graxos derivados de ácidos graxos saturados e insaturados como, por exemplo, esteárico e ricinoléico, respectivamente. Após, foi avaliada a capacidade destes compostos para a gelificação de hidrocarbonetos e as propriedades dos géis formados foram estudadas pelas técnicas de Espectroscopia de Infravermelho (IV) e Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC). A síntese dos N-acilaminoésteres graxos foi realizada na presença de DCC, DMAP e dos respectivos aminoésteres e ácidos graxos. Os N-acilaminoésteres graxos 11-15a-d foram isolados em rendimentos que variaram de 50-84%, após 12h de reação a temperatura ambiente. Os N-acilaminoácidos graxos 16-20a-d foram obtidos a partir da hidrólise básica de 11-15a-d realizada a temperatura ambiente, em rendimentos que variaram de 34-80%. A seguir foi realizado o estudo de gelificação com todos os compostos sintetizados para verificar a influência das diferentes cadeias graxas e dos grupos laterais dos aminoácidos e aminoésteres na gelificação de tolueno, hexano e gasolina. As análises de DSC e IV mostraram que a estabilidade dos géis dependeu do tipo e do tamanho da cadeia lipofílica e também da natureza dos grupos laterais ligados ao átomo de nitrogênio. Dentre os compostos testados os compostos 17a-b de cadeia satura (C16:0 e C18:0) e 19a (C16:0), derivados da alanina e da fenilalanina, respectivamente, formaram géis em hexano, gasolina e tolueno. Pela primeira vez foram citadas as capacidades de gelificação de hidrocarbonetos pelos Nacilaminoésteres graxos 15a-b de cadeia saturada, derivados da serina, sendo os géis derivados destes compostos os mais estáveis termicamente dentre todos os obtidos.

Lipid and lipid carbon stable isotope composition of the hydrothermal vent shrimp Mirocaris fortunata: evidence for nutritional dependence on photosynthetically fixed carbon

Mirocaris fortunata were sampled from the Lucky Strike hydrothermal vent area (Eiffel Tower site) on the mid-Atlantic ridge during the French DIVA 2 cruise (June 1994). Small adults (17 to 22 mm total length), although morphologically identical, could be divided into 2 categories on the basis of pigmentation, lipid composition and C-13/C-12 stable isotope ratios of fatty acids. Highly pigmented small adults (8.6 to 9.2 mu g carotenoid shrimp(-1)) contained higher levels of total lipid than similar-sized individuals containing lower levels of pigment (0.9 to 2.9 mu g carotenoid shrimp(-1)). Lipid class analysis indicated that wax esters comprised 62.5% of total lipid in the former group. These pigmented shrimp also contained high proportions of polyunsaturated fatty acids (PUFA), particularly the phototrophic microplanktonic markers 20:5(n-3) and 22:6(n-3) (14.0 and 33.5% respectively). By contrast small adults (22 mm) and adult shrimp (25 to 26 mm) with low levels of carotenoid pigmentation contained lower amounts of total lipid, little or no wax ester and low levels of 20:5(n-3) and 22:6(n-3), but did contain 16:2(n-4) and 18:2(n-4) and the non-methylene interrupted dienes 20:2 Delta 5,13 and 22:2 Delta 7,15. GC-IRMS analysis of all fatty acids and fatty alcohols in the pigmented small adults indicated delta(13)C values of -18.2 to -27.7 parts per thousand, which is consistent with a photosynthetic carbon source for these compounds. The C-13/C-12 isotope composition of fatty acids from low-pigmented small adults and adults was more variable (-12.5 to -33.1 parts per thousand) and suggests a bimodal distribution which may be attributable to differing nutritional sources or the physiological/reproductive status of these shrimp. Samples of eggs, which are carried by the female on the pleopods, represented approximately 57% of total somatic lipid which indicates a substantial reproductive investment by this species. The egg lipids comprised high proportions of triacylglycerols (64.4 to 78.0% of total lipid) whilst the fatty acid composition was dominated by the monounsaturated fatty acids 16:1(n-7), 18:1(n-7) and 18:1(n-9), which accounted for 65.7 to 33.5% of total fatty acids. By contrast, PUFA were relatively minor components of egg lipids, particularly 20:5(n-3) and 22:6(n-3), which accounted for only 1.1 and 2.9% of total egg fatty acids respectively. This indicates that the reproductive investment by this species is supported mainly by material derived from bacterial chemosynthesis. The potential for M. fortunata hedge betting by producing larvae which either metamorphose at the vent site or adopt a bathypelagic lifestyle and delay metamorphosis to facilitate more widespread dispersal is discussed.