Desenvolvimento de kit para quantificação enzimática de etanol

A dosagem do etanol durante a produção de medicamentos, bebidas e combustíveis tem se mostrado bastante importante para o aumento de rendimento dos processos e qualidade dos produtos. Embora existam vários métodos para determinar a concentração do etanol, os enzimáticos são os mais interessantes por serem rápidos, precisos, de fácil manuseio e baixo custo. O objetivo geral desse trabalho foi a elaboração de um Kit de quantificação enzimática de etanol, utilizando a enzima álcool desidrogenase I recombinante de S. cerevisiae (Adh1). Para isso, o gene codificador da enzima álcool desidrogenase I (ADH1) de levedura foi clonado no vetor pET28a para expressão em E. coli (BL21). Em seguida, a produção e solubilidade da enzima álcool desidrogenase I foi determinada, sendo definida uma condição ideal de produção e purificação da proteína recombinante por cromatografia de afinidade. A atividade enzimática da álcool desidrogenase I purificada foi determinada através de ensaios já padronizados na literatura (UV), bem como sua estabilidade em diversas condições de tempo e temperatura. Os resultados obtidos aqui demonstraram que a enzima obtida apresentou boa atividade biológica in vitro, com sensibilidade na detecção de no mínimo 2,3 x 10–4 g/L de etanol em 2 minutos. Além disso, a proteína purificada teve sua atividade preservada quando estocada a - 20°C durante 120 dias, características que possibilitarão que a enzima álcool desidrogenase I recombinante, purificada pela metodologia apresentada nesse trabalho, seja utilizada em um kit de quantificação enzimática de etanol rápido, preciso e de baixo custo

Estudo da tratabilidade de água pluvial utilizando coagulante natural a base de tanino visando fins não potáveis

This paper aimed to study the treatability of rainwater collected in Rio Claro, SP, using natural coagulant tannin based. The tannin was compared with other too primary coagulants, namely ferric chloride and corn starch. Assays were performed in laboratory scale using equipment known as Jarteste and aimed to study the conditions most suitable dosage and coagulation pH. First tests were conducted to compare the coagulating and determination of the conditions to be used in the following tests, taking as a criterion the greatest efficiency for water treatment. Also performed were performed tests to construct the tannin coagulation diagram, using the optimal concentration found in the previous phase, by varying the dosage of coagulant and the pH of clotting in order to determine the isoefficiency regions for apparent color and turbidity. Finally, tests were performed cyclically filtration with filter paper. Preliminary tests indicated that the vegetable tannin concentration 3% (m/m) from the commercial solution was presented the best set of results (84.3% removal of apparent color and 82.51% removal of turbidity) compared to ferric chloride (66.25% removal efficiency and apparent color of turbidity 67.82%) and starch (73.68% removal efficiency apparent color and turbidity to 67.19%). The coagulation diagrams indicate that the best region to work with vegetable tannin 3% is where the coagulant dosage ranges from 15 mg/L to about 37.5 mg/L and coagulation pH ranging from about 6.5 to 7.5. The cyclic filtration showed to be not efficient for the best dosage of coagulant, due to the process of clogging of the filter paper, but proved to be efficient for other dosages. Thus, for the waters studied, the results indicate that the natural coagulant based tannin is an alternative to conventional coagulants, possessing benefits of technical and environmental

Resolução de problema de valor no contorno associado ao projeto de reatores de fluxo disperso empregados no tratamento de efluentes

The objective of this work was to develop a numerical method to solve boundary value problems concerning to the use of dispersion model for describing the hydraulic behavior of chemical or biological reactors employed in the wastewater treatment. The numerical method was implemented in FORTRAN language generating a computational program which was applied to solve cases involving reaction kinetics of both integer and fractional orders. The developed method was able to solve the proposed problems evidencing to be a useful tool that provides more accurate design of wastewater treatment reactors

Estudo sobre a condição de coleta e tratamento de esgoto sanitário do município de Ubatuba-SP

The actual work broaches a study about the collection and treatment of sanitary sewage from the municipality of Ubatuba in its operational aspects and the tariff policy from the service. Themes related to the subject like the history of collection and treatment of sewage, its development in Brazil and its importance for public health and environmental preservation, as well as historical and geographical aspects of Ubatuba/SP, are present in the literature review. The methodology consists in guided visit in the colletion and treatment of sewage facilities and interview with technical managers. With the technical data obtained, it is made a discussion of the results and possible recommendations

Otimização de um método cromatográfico de análise de pesticidas organoclorados em amostras de peixes

Considering that persistent organic pollutants (POPs) including synthetic substances belonging to differents organic functions, including organochlorine pesticides (OCPs), which are the most persistent and bioaccumulative, with high toxicity to humans and animals. Accordingly environmental and biological monitoring is necessary, in order to have greater control regarding the irresponsible use of these products. Though there are several analytical methodology reported in the literature to make determinations of this pesticide, they present some difficulties, requiring several steps to make the clean up of the sample. The proposed project aims to optimize a new analytical method that allows to perform the extraction of organochlorine pesticides in fish tissues, employing acetone as solvent assisted by ultrasound bath, making the method more quickly and not requiringfurther steps to purify the sample. Were analyzed the recoveries of pesticides in study in samples of tilapia average values: Heptachlor=84,7±9,8%; Aldrin=87,3±3,5%; Endosulfan=101,4±18,6%; DDE= 90,5± 3,3%, Endrin=102,2±13,8%., DDD=92,1±19,9%; DDT=90,8±6,8%. The real samples showed values granted for our legislation and low values of error

Desidratação de lodo proveniente de ETA através de tubos geotexteis

Currently exists a growing concern for the preservation of the environment Around the world, the environmental awareness in Brazil has strengthened during the past two decades. This concern in Brazil arises from the creation of mechanisms of supervision and punishment on the part of the environmental agencies. In order to meet the pertinent legislation many public and private companies have performed dehydration of waste generated in the process of treatment of industrial effluents, waste water and water treatment in order to reduce transport and disposal costs. The use of geotextile tubes has proven technically and economically feasible to be applied in various situations from water treatment to mining tailings. This work presents the solution adopted for an environmental liability in water treatment plant through the use of geotextile tubes to reduce the water content of the disposal. We evaluated the size distribution curves, Atterberg limits, and chemical composition of the residue. Found high concentrations of aluminum in the waste which would characterize environmental pollution if disposed off directly in nature with no treatment

Produção de polpa solúvel a partir de Eucalyptus urograndis

The wood of the gender Eucalyptus occupies a prominence place in relation to other cellulose sources, due to its chemical composition, its low cost, abundance and availability. The dissolving pulp obtaining occurs basically starting from three stages: prehydrolysis of the wood following by cooking and finally by the bleaching process. In the dissolving pulp production is necessary a pretreatment stage for the hemicelluloses removal. Among the chemical cooking processes, the Kraft process is the most used for cellulosic pulps production starting from eucalyptus, in the additive presence or not. The anthraquinone uses in the pulping process has as main purposes increasing the delignification rate as well as protecting the pulp regarding the degradation of the polysaccharide chains. The ECF bleaching process consists of the purification of the pulp through bleaching agents, being excepted the elementary chlorine. The dissolving pulp is a pulp of high a-cellulose content and purity destined to the cellulose derivatives production as carboxymethyl cellulose, nitrocellulose and microcrystalline cellulose. The production of a certain product, as well as its final application, is determined by the chemical properties of the pulp. The present work had as purpose producing cellulosic pulp with kappa number around 9 destined to the production of dissolving pulp in way to evaluate the use of the anthraquinone (AQ) in the Kraft process according to the chemical properties of the obtained pulps. It has been still intended developing an effective technology of bleaching for the high purity and quality dissolving pulp production. The prehydrolysis was accomplished in laboratory rotational autoclave for 30 minutes at 170ºC in the water:wood rate 3,5:1 (L:kg). The Kraft/AQ pulping were accomplished in laboratory rotational autoclave being initially modified the active alkali load (10, 13, 16 and 19%) at sulfidity of 25% ...

Influência de diferentes extratos de Cordia ecalyculata em cultura de células-tronco mesenquimais humanas

Diante da constatação clínica de que muitos pacientes não conseguem benefício completo da remissão da ulceração em membros inferiores com os tratamentos convencionais, o Setor de Biotecnologia do Hemocentro de Botucatu estabeleceu o protocolo de produção de curativos bioativos, que interagem com a lesão e estimulam via hormônios de crescimento (PDGF, VEFG, FGF e outros) a recuperação da área danificada por indução das células-tronco comissionadas da pele. Estudos realizados na Faculdade de Química de Araraquara culminaram com a purificação do princípio ativo do fitoterápico Cordia ecalyculata para analisar in vitro o seu alto potencial antiinflamatório. Seus diferentes extratos foram enviados ao Laboratório de Engenharia Celular da Faculdade de Medicina de Botucatu: extrato bruto (EB), fase aquosa (FA), fase hexânica (FH) e fase etérea (FE), que foram testados em diferentes concentrações em cultura de células-tronco mesenquimais humanas (CTM), oriundas de tecido adiposo, com a finalidade de analisar, através de caspase-3, marcador intracelular, o índice de apoptose. Aquele que apresentar o melhor resultado será adicionado à fórmula dos biocurativos. Este trabalho tem os objetivos de avaliar a contribuição da cultura celular de CTM nos testes de tolerância com Cordia ecalyculata, estabelecer o índice de apoptose celular e avaliar o tempo de confluência maior que 80% na cultura de CTM em diferentes concentrações de C. ecalyculata. Os resultados encontrados comprovaram que os extratos que apresentaram os melhores desempenhos foram os da FA em todas as concentrações e FE de 25μg/mL. Os extratos FE nas demais concentrações demonstraram um desempenho insatisfatório,o que nos indica que uma concentração entre 25 e 50μg/mL seja o limite entre a boa execução nas células e toxicidade. Mais testes terão que ser realizados para demonstrar qual é essa concentração de FA é realmente melhor a ser utilizada

Proposição de uma nova vacina para Brucelose bovina usando uma abordagem biotecnológica

A utilização de novas tecnologias empregando a biologia molecular busca superar os principais problemas encontrados nas vacinas atualmente comercializadas no combate à brucelose bovina. Desta forma, a identificação de proteínas imunogênicas e a posterior transformação dos genes correspondentes em micro-organismos competentes tem sido um dos principais alvos para o desenvolvimento de novas formas de controle da infecção. O presente trabalho tem como objetivo propor, em base teórica, uma vacina de eficácia e segurança superiores às encontradas atualmente no mercado contra a brucelose bovina, antropozoonose contagiosa provocada principalmente pela espécie Brucella abortus. Essa enfermidade produz infecção característica em bovinos e bubalinos e é infecciosa ao homem, causando doença crônica que leva à incapacidade parcial ou total para o trabalho. Por ter distribuição universal, acarreta problemas sanitário e de saúde pública importantes e grandes prejuízos econômicos. A vacina proposta visa o desenvolvimento de microorganismos transformados contendo genes de proteínas de potencial imunológico que, após purificação, são usadas para o combate da doença. As proteínas recombinantes abordadas no presente estudo são as proteína ribossomal L7/L12 e a lumazina sintetase que, ao serem utilizadas em uma vacina subcelular, diferente das comercializadas atualmente, induzem resposta de longa duração, não induzem a produção de anticorpos que interfiram no diagnóstico e não são patogênicas ao homem.

Toxicidade a Saccharomyces cerevisiae e ecotoxicidade de efluente contendo corante remazol vermelho brilhante tratado pelo processo fotoeletrolítico

Não disponível

Obtenção de uma nova proteína recombinante componente do complexo telemérico LAGT1 de Leishmania Amazonensis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Caracterização de anticorpos anti-idiotípicos e anti-anti-idiotípicos de BEVACIZUMAB

Propomos avaliar o potencial de uma abordagem imunoterápica que tem o fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) como alvo. A angiogênese é necessária para nutrir o tumor e propicia sua metastatização. Sabe-se que VEGF é produzido pela maioria dos tumores sólidos metastatizantes. A eficiência do anticorpo anti-VEGF, BEVACIZUMAB, já foi demonstrada. Entretanto, efeitos adversos limitam sua utilização em alguns casos e, com base na teoria da rede idiotípica e na experiência do grupo com anticorpos anti-idiotípicos (anti-Id ou AB2), anticorpos AB2 capazes de mimetizar VEGF foram obtidos. Assim, com o objetivo de explorar o rationale, dois anticorpos monoclonais (MAb) anti-Id de Bevacizumab, 10.D7 e 3.E3, foram produzidos em nosso laboratório. O controle da purificação de anticorpos foi feito através da avaliação do material purificado em géis de poliacrilamida. Immunoblots comprovaram a especificidade do reconhecimento do idiotipo de Bevacizumab pelos MAbs anti-Id. Foi mostrado que os AB2 obtidos se ligam a moléculas da superfície de células endoteliais, que expressam receptores de VEGF, sugerindo que esses anticorpos mimetizam VEGF. Entretanto, não foi possível verificar inibição do crescimento dessas células quando cultivadas em presença desses MAbs. Será necessária a otimização dos protocolos utilizados para uma avaliação mais definitiva. Uma vez demonstrada a atividade anti-idiotípica dos AB2 in vitro, 10.D7 e 3.E3 foram utilizados como imunógenos em camundongos Balb/c, com o objetivo de avaliar a resposta AB3 ou anti-anti-Id. Por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto foi verificada a presença de anticorpos anti-anti-Id ligantes de VEGF nos soros dos camundongos imunizados. Os animais imunizados com o MAb 10.D7 responderam melhor do que os imunizados com 3.E3. Anticorpos IgG purificados dos soros desses animais reconheceram VEGF em ensaios imunoenzimáticos. Foram então selecionados os ...

Introdução de Lentinulaedodes (Shiitake) e Pleurotusostreatus (Shimeji) em bagaço de cana termo explodido para diminuição da toxicidade

Ethanol production has gained great prominence in the investment new renewable energy sources and Brazil is among the leaders of production. However, this activity generates large amounts of waste being the largest volume of the sugar cane bagasse. For this reason looking up ways to use this material as burning for energy production and composition of forage in the diet of ruminants, however there are difficulties to use this production for this last one. This paper proposes a microbiological treatment with Lentinula edodes and Pleurotus ostreatus in order to enable the bagasse in ruminant feed composition in order to be used more noble than their burning. After treatment with the fungus, tests were performed for quantifying crude protein by the method of Kjeldhal. It was verified that the protein content in the pure bagasse was 1.0% after fermentation the protein content was 4.2% with L.edodes and 4.9% with P. ostreatus. To evaluate the protein quality of the product fermented by L. edodes and P. ostreatus was applied microbiological method for growth of Enterococcus zimogenes verifying that after fermentation the protein quality was 76 and 27.4% with L. edodes and P.ostreatus, respectively, compared with casein. The quantification of amino acids showed significant improvement of protein with altered amino acid profile with treatments of fungos. About of DQO and BOD were also found considerable improvement besides considerable drop in toxicity as measured by acute toxicity test with Daphinia similis

Estudo de caso da qualidade de águas superficiais nos bairros Colônia do Piaguí e Santa Luzia no município de Guaratinguetá

The work is to study about the quality of surface waters of the Piaguí and neighborhoods Colonia Santa Luzia. Six samples of which the physical, chemical and biological parameters were analyzed were collected. The tests were conducted in accordance with Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater 20th edition and compared with the resolution of CONAMA No. 357 (2005). Critical parameters are found in fecal coliform and water coloring, which may indicate an anthropogenic interference in the sampling points (domestic sewage), or the effect of rainfall during the collection period influence the results

Avaliação da qualidade da água no sistema de abastecimento da cidade de Santa Lúcia - SP

água que abastece uma cidade se não for tratada pode tornar-se importante veículo de transmissores de doenças. O controle da qualidade é uma medida que visa, principalmente, garantir a saúde da população. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a qualidade da água distribuída pelo sistema de abastecimento da cidade de Santa Lúcia – SP. A água proveniente desse sistema chega até as residências e, muitas vezes, é consumida sem nenhum tratamento doméstico complementar. A cidade de Santa Lúcia é abastecida por três poços profundos (P2, P3, e P4). Com o intuito de avaliar a qualidade da água captada desses poços e distribuídas para consumo humano foram coletadas amostras diretamente dos poços e de um ponto de consumo nas áreas abastecidas por cada poço. Foram feitas três coletas em cada ponto, em três diferentes épocas do ano. Realizaram-se análises físico-químicas e bacteriológicas em todas as amostras. As análises bacteriológicas foram feitas para determinação da presença de coliformes totais, E. coli e contagem padrão de bactérias heterotróficas em placa. As análises físico-químicas avaliaram cloro residual livre, fluoreto, turbidez, pH, cor aparente e sólidos totais dissolvidos. Duas amostras foram positivas para coliformes totais, apenas uma amostra coletada no poço 2 foi positiva para E. coli. Para bactérias heterotróficas todas a amostras apresentaram contagem em placa inferior a 500 UFC/mL. Todas as amostras estavam dentro do padrão determinado pela legislação para pH, turbidez e sólidos totais dissolvidos. Todas as amostras coletadas no poço 2 tiveram como resultado ausência de cloro residual livre, o mesmo resultado para os demais pontos na segunda coleta de amostras. Todas as amostras apresentaram fluoreto com valores abaixo do VMP estabelecido pela legislação brasileira porém apenas cinco com concentrações dentro da faixa estabelecida pela legislação do Estado de São Paulo ...