978 resultados para Córtex Cerebral Crescimento
Resumo:
O acidente vascular cerebral (AVC) a maior causa de mortes e incapacidades neurolgicas no Brasil, e mais de 80% deles so decorrentes de evento isqumico. Os sobreviventes de AVC apresentam uma variedade de dficits motores, cognitivos e sensoriais, que prejudicam suas atividades de vida diria, limitando assim sua independncia. Portanto, torna-se cada vez mais necessrio elaborar estratgias teraputicas que promovam a recuperao funcional de pacientes acometidos por AVC. Aps isquemia do tecido nervoso, ocorre no meio extracelular a super expresso de molculas inibitrias a regenerao neuronal e plasticidade sinptica, como os proteoglicanos de sulfato de condroitina (PGSCs), o principal componente das redes perineuronais (RPNs). A remoo destas molculas com a ao da enzima condroitinase ABC (ChABC) tem sido usada como estratgia para induzir a plasticidade neuronal. Outro fator que tem sido utilizado para estimular a neuroplasticidade o exerccio fsico especfico para o membro afetado aps AVC. O exerccio fsico est relacionado liberao de neurotrofinas, importantes para a regenerao do sistema nervoso. Portanto, a remoo dos PGSCs junto com o exerccio fsico pode potencializar a induo da plasticidade cerebral e recuperao funcional aps leso isqumica experimental na rea sensrio-motora de ratos. Para testar nossa hiptese, utilizamos n=16 ratos (Ratus norvergicus) da linhagem Wistar, divididos nos seguintes grupos experimentais (todos com sobrevida de 21 dias aps AVC isqumico): Grupo Controle ou BSA (Isquemia experimental, implante de Elvax saturado com BSA); Grupo Exerccio (Isquemia experimental, implante de Elvax saturado com BSA + exerccio fsico especfico); Grupo ChABC (Isquemia experimental, implante de Elvax saturado com ChABC); e Grupo ChABC + Exerccio (Isquemia experimental, implante de Elvax saturado com ChABC + exerccio fsico especfico). A leso isqumica foi induzida atravs de microinjees do vasoconstritor Endotelina-1 (ET-1) no córtex sensrio-motor, na representao da pata anterior. Logo em seguida foi implantado uma microfatia de polmero de Etileno vinil acetato saturado com ChABC (grupos ChABC e ChABC + Exerccio) ou BSA (grupos Controle e Exerccio). Foram avaliadas a rea de leso e a degradao dos PGSCs, alm da recuperao funcional da pata afetada atravs do teste da explorao vertical e do teste da escada horizontal. Avaliamos a rea de leso (mm<sup>2</sup>) com auxlio do programa ImageJ (NIH, USA), delimitando a rea com palor celular e tambm marcada com azul de colanil que estava presente na soluo de injeo do peptdeo vasoconstritor ET-1 e verificamos que no houve diferena significativa no tamanho da rea de leso entre os grupos Controle (0,480,12), Exerccio (0,460,05), ChABC (0,500,18) e ChABC + Exerccio (0,550,05) (ANOVA, ps-teste de Tukey, ***p<0,001; **<0,01; *p<0,5). Animais que foram submetidos remoo enzimtica dos PGSCs apresentaram imunomarcao para o anticorpo anti-condroitin-4-sulfato (C4S) na rea de leso ao final da sobrevida, no havendo evidencias de degradao de PGSCs nos grupos Controle e Exerccio. Verificamos ainda no teste do cilindro que a induo da leso isqumica no provocou perda funcional ampla, no alterando o comportamento exploratrio, nem a frequncia de uso da pata anterior afetada dos animais aps a leso (grupo Controle: pr-leso ou baseline (0,330,10), 3 (0,290,17), 7 (0,300,10), 14 (0,290,16) e 21 (0,270,13) dias aps a leso; grupo Exerccio: pr-leso ou baseline (0,300,12), 3 (0,320,24), 7 (0,190,37), 14 (0,310,10) e 21 (0,320,09) dias aps a leso; grupo ChABC: pr-leso ou baseline (0,340,07), 3 (0,200,11), 7 (0,230,07), 14 (0,330,14) e 21 (0,390,16) dias aps a leso; grupo ChABC + Exerccio: pr-leso ou baseline (0,340,04), 3 (0,200,09), 7 (0,260,04), 14 (0,180,08) e 21 (0,270,04) dias aps a leso) (ANOVA, ps-teste de Tukey, ***p<0,001; **<0,01; *p<0,5). O grupo que teve apenas a remoo dos PGSCs apresentou um melhor desempenho motor no teste da escada horizontal, mantendo sua frequncia de acertos quando comparado aos demais grupos, sendo que ao final da sobrevida de 21 dias, os grupos Controle e ChABC + Exerccio alcanaram uma recuperao espontnea (equivalente ao teste pr-leso), se aproximando do grupo ChABC. Apenas o grupo tratado somente com Exerccio no alcanou a recuperao espontnea, apresentando um desempenho motor significativamente inferior aos demais grupos em todos os momentos de reavaliao (grupo Controle: pr-leso ou baseline (7,700,54), 3 (5,300,71), 7 (5,41,14), 14 (5,200,37) e 21 (6,700,48) dias aps a leso; grupo Exerccio: pr-leso ou baseline (8,400,28), 3 (4,300,48), 7 (4,750,50), 14 (5,350,41) e 21 (5,050,67) dias aps a leso; grupo ChABC: pr-leso ou baseline (7,650,97), 3 (6,900,65), 7 (7,800,37), 14 (7,150,87) e 21 (7,450,32) dias aps a leso; e grupo ChABC + Exerccio: pr-leso ou baseline (8,100,22), 3 (3,651,48), 7 (4,951,06), 14 (7,350,37) e 21 (6,700,48) dias aps a leso (ANOVA, ps-teste de Tukey, ***p<0,001; **<0,01; *p<0,5). Portanto, a remoo dos PGSCs, o exerccio fsico forado precoce e sua associao no influenciaram no tamanho da rea de leso aps isquemia focal no córtex sensrio-motor. Porm, apenas a remoo dos PGSCs das redes perineuronais melhorou precocemente o desempenho motor do membro afetado aps isquemia focal no córtex sensrio-motor. Enquanto que a remoo dos PGSCs associada ao exerccio fsico melhorou o desempenho motor do membro afetado aps a leso, porm essa melhora foi tardia. E o exerccio fsico aplicado precocemente aps isquemia focal no córtex sensrio-motor prejudicou o desempenho motor do membro afetado.
Resumo:
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior - CAPES
Resumo:
O crebro infantil humano submetido hipxia-isquemia (HI) apresenta perda de oligodendrcitos, hipomielinizao, astrogliose, alteraes no desenvolvimento cortical e no comportamento motor, incluindo a paralisia cerebral. O cerebelo desempenha um importante papel no controle motor e diversos danos vm sendo observados em humanos e animais que sofreram HI. A excitotoxicidade glutamatrgica frequentemente associada HI e junes celulares podem ser responsveis pela transferncia de molculas capazes de modular os danos decorrentes. Dados prvios de nosso grupo utilizando um modelo de HI pr-natal em ratos demonstraram danos permanentes na estrutura cerebelar, indicando que os efeitos deletrios da HI pr-natal podem ser mantidos at a vida adulta. O objetivo deste trabalho foi caracterizar os nveis de conexinas, receptores e transportadores de glutamato ao longo do desenvolvimento do cerebelo HI, e avaliar a configurao das junes celulares em culturas de astrcitos derivadas do cerebelo de ratos submetidos a esse modelo. Ratas no 18 dia de gestao, aps anestesia, tiveram as quatro artrias uterinas obstrudas por 45 minutos (Grupo HI). Animais controle tiveram os teros expostos sem sofrer a obstruo (Grupo SH). A gestao prosseguiu e apenas filhotes nascidos a termo foram utilizados. Os animais foram decapitados aos 2 (P2), 9 (P9), 16 (P16),23 (P23), 30 (P30), 45 (P45) e 90 (P90) dias ps-natal. Os cerebelos foram submetidos tcnica de Western blotting utilizando os anticorpos anti-NR2B, anti-GluR3, anti-EAAT1, anti-GFAP e anti-Cx43. Para a cultura de astrcitos foram utilizados cerebelos de animais P2. Aps terem atingido confluncia, as clulas foram fixadas e imunomarcadas com os anticorpos anti-Cx43, anti-GFAP, anti-nestina e anti-A2B5. Nossos resultados demonstram diferenas nos nveis de GluR3 durante o desenvolvimento do cerebelo SH e HI, havendo uma reduo significativa da expresso desta subunidade no grupo HI em P9. Por outro lado, no foram verificadas alteraes nos nveis de NR2B e de GFAP entre os grupos nas diferentes idades. Observou-se reduo significativa de Cx43 em animais HI em P2 bem como nos astrcitos HI em cultura, os quais tambm apresentaram alteraes morfolgicas e diferenas na expresso do marcador A2B5. A alterao referente a GluR3 no grupo HI pode ser causada pela reduo da arborizao das clulas de Purkinje e pela reduo no nmero de precursores de oligodendrcitos no cerebelo de animais HI em P9, j observadas em nosso laboratrio. A diminuio de Cx43 indica que a passagem de substncias por canais astrocitrios pode estar reduzida e contribuir para a expanso dos danos persistentes descritos em HI. Alteraes morfolgicas e na expresso de marcadores da diferenciao de astrcitos podem refletir os potenciais efeitos de HI sobre a maturao destas clulas a longo-prazo. Nossos resultados apontam que a HI sistmica pr-natal pode ser responsvel por alteraes que caracterizam a excitotoxicidade glutamatrgica. Ressaltamos tambm a importncia da comunicao entre astrcitos como estratgia neuroprotetora nesta leso.
Resumo:
A Organizao Mundial da Sade estima que existam aproximadamente 250 milhes de mulheres tabagistas no mundo. Em pases em desenvolvimento, a prevalncia do tabagismo pode variar de 11 a 35% em mulheres grvidas, constituindo um problema de sade pblica. Nicotina, um agonista colinrgico considerado o mais importante componente ativo da fumaa do cigarro, capaz de causar dficits em um crebro em desenvolvimento, no entanto, muitos estudos investigam estes efeitos durante a gestao de roedores, que corresponde aos dois primeiros trimestres de gestao em humanos. O presente estudo, foi focado nos efeitos da nicotina sobre o sistema colinrgico cerebral durante o equivalente ao terceiro trimestre de gestao em humanos. Ratas lactantes foram expostas a nicotina (NIC, 6 mg/Kg/dia) ou a salina (SAL) via mini-bombas osmticas (s.c.) a partir do 2 dia ate o 16 dia ps-natal (PN). Filhotes NIC e SAL foram sacrificados durante a exposio, em PN15, e aps a retirada em trs momentos diferentes, PN21, PN30 e em PN90. Quatro biomarcadores foram considerados. Para avaliao dos efeitos sobre os receptores nicotnicos de acetilcolina (nAChRs), ns utilizamos [3H]citisina, que um ligante seletivo para α4β2. Nos tambm medimos o marcador [3H]hemicholinium-3 (CH-3) de alta afinidade para o transportador pr-sinptico de colina, e a atividade das enzimas colina acetiltransferase (ChAT) e acetilcolinesterase (AChE) no córtex cerebral (CX), mesencfalo (MB) e hipocampo (HP) na prole. O grupo NIC apresentou supra-regulao de nAChRs em todas as regies durante a exposio, este efeito foi revertido pouco tempo aps a retirada. Interessantemente, uma significante infra-regulao de nAChRs foi observada aps um longo tempo da retirada somente em CX. A exposio nicotina reduziu a marcao para HC-3 durante a exposio em todas as regies e foi revertida em PN21. J em PN30, o grupo NIC apresentou uma diminuio do HC-3. Em contraste, em PN90, foi observado um aumento de HC-3. No foram observados efeitos para atividade da ChAT e da AChE em CX. No que diz respeito ao MB, o grupo NIC apresentou um aumento de atividade para ambas as enzimas, ChAT e AChE, em PN30. Para a mesma idade, nos observamos um decrscimo desta atividade somente em HP. E, aps um longo tempo de retirada, somente HP apresentou um aumento na atividade da ChAT. Estes dados sugerem que a exposio nicotina em ratos durante o equivalente ao terceiro trimestre de gestao em humanos promove alteraes no sistema colinrgico dos filhotes. Somado a isto, nossos resultados indicam que os efeitos prejudiciais so observveis mesmo muito tempo aps a exposio ter sido interrompida.
Resumo:
Para um adequado funcionamento do SNC, so necessrias complexas interaes entre os sistemas de neurotransmisso inibitrio e excitatrio. Desequilbrios nos sistemas, e/ou na sua interao, podem acarretar comprometimentos neuropsiquitricos. Vrias etapas do desenvolvimento ontogentico cerebral, incluindo proliferao e migrao neuronal, crescimento cerebral e mielinizao, astrocitognese e morte celular programada, so alteradas pela desnutrio protica. Alteraes no sistema glutamatrgico decorrentes de desnutrio, padres de desenvolvimento afetados no sistema GABArgico como a atividade da glutamato descarboxilase (GAD) e mRNA de subunidades de receptores GABAA , alteraes nas reaes a frmacos envolvendo o sistema GABArgico, alm de estudos epidemiolgicos que apontam para a maior incidncia de doenas neuropsiquitricas em populaes desnutridas precocemente e, ainda, os transtornos nas complexas interaes entre clulas neuronais e gliais, que acompanham o desenvolvimento destas patologias, levantam questionamentos sobre as implicaes da desnutrio sobre o metabolismo cerebral e parmetros inibitrios e excitatrios sob condies de excitotoxicidade. Considerando estes aspectos, investigou-se a sensibilidade a drogas convulsivantes agindo sobre os sistemas glutamatrgico (cido quinolnico) e GABArgico (picrotoxina), assim como se procurou detectar interferncias provocadas pela desnutrio protica gestacional e ps-natal, e/ou drogas em um dos parmetros, que, alm da biossntese, liberao, interao com receptores, determina uma neurotransmisso eficiente, qual seja: na inativao dos dois principais neurotransmissores excitatrio e inibitrio, glutamato e GABA, respectivamente, por meio da captao mediada por transportadores localizados nas membranas neuronais e gliais de córtex e hipocampo de ratos em desenvolvimento, assim como parmetros ontogenticos ligados ao transporte de GABA. A sensibilidade picrotoxina foi avaliada ainda segundo parmetros metablicos, envolvendo o metabolismo da glicose e do acetato, procurando detectar interaes neurnio-glia na resposta droga, assim como a ocorrncia de peroxidao lipdica, dado o seu envolvimento no processo convulsivante. Considerando que o acetato metabolizado predominantemente pelos astrcitos, clulas que tm importante papel no fluxo de substratos energticos aos neurnios, a sua oxidao foi avaliada em fatias de córtex cerebral de ratos adultos, frente a diferentes concentraes extracelulares de potssio. A desnutrio acarretou menor sensibilidade ao convulsivante do cido quinolnico, em ratos de 25 dias de idade, excluindo alteraes na captao de glutamato como mecanismo envolvido, uma vez que este parmetro no foi afetado pela desnutrio e/ou droga. Contrariamente, a desnutrio induziu maior sensibilidade ao convulsivante da picrotoxina, em ratos de 25 dias, o que pode estar relacionado maior captao de GABA por fatias de córtex cerebral e hipocampo evidenciadas no grupo desnutrido. A desnutrio alterou o perfil ontogentico da captao de GABA por fatias de córtex cerebral e tambm o perfil inibitrio da -alanina (inibidor de GAT-3), dando suporte hiptese de que a maior captao de GABA em ratos desnutridos em desenvolvimento seja devida predominantemente a este transportador. A maior sensibilidade picrotoxina no grupo desnutrido tambm foi evidenciada pelo maior estmulo oxidao da glicose em fatias de córtex cerebral (que tambm idade dependente) e peroxidao lipdica. Enquanto em ratos imaturos a administrao de uma nica dose de picrotoxina mostrou a maior susceptibilidade de ratos desnutridos, no procedimento de kindling qumico pela picrotoxina em ratos em desenvolvimento, a susceptibilidade mostrou-se sexo e tratamento nutricional dependente. A picrotoxina estimulou a oxidao do acetato a CO2, mas no a da glicose em perodo precoce ps picrotoxina (24 horas) em fatias de córtex e hipocampo de ratos de 25 dias, indicando o envolvimento astrocitrio na resposta ao agente convulsivante, independente do tratamento nutricional. A administrao crnica de picrotoxina acarretou estmulo oxidao da glicose em fatias de córtex de ratos desnutridos, mostrando efeito tempo e tratamento nutricional-dependente sobre o metabolismo da glicose, sem alterao da oxidao do acetato. Altas concentraes de potssio extracelular aumentaram a oxidao do acetato em fatias de córtex cerebral, em funo da reduo intracelular de sdio em ratos controle e desnutridos adultos; o agravamento do dficit nutricional exacerbou a oxidao do acetato em fatias de cerebelo. A desnutrio pr e ps-natal afeta respostas envolvendo os sistemas GABArgico e glutamatrgico em situaes de excitotoxicidade, provocada por antagonista de receptor GABAA, picrotoxina e por hiperestimulador do sistema glutamatrgico, cido quinolnico, em ratos em desenvolvimento, assim como parmetros ontogenticos ligados ao transporte de GABA. A severidade da restrio nutricional fator determinante da exacerbao do estmulo oxidao do acetato. Alm do mais, a desnutrio parece afetar a interao neurnio-glia em condies de excitotoxicidade.
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Os mecanismos envolvidos nas atividades toxicolgicas e/ou farmacolgicas dos compostos orgnicos de selnio so pouco conhecidos. Os compostos orgnicos de selnio (disseleneto de difenila e ebselen) e organotelrio (ditelureto de difenila) foram alvo dos trabalhos realizadosin vitro, neste estudo. Os compostos organocalcognios apresentaram efeitos diversos sobre o influxo de 45Ca2+ medido em sinaptossomas de crebro de rato, dependendo das condies e agentes despolarizantes usados. Ebselen, (PhSe)2 e (PhTe)2 alteram a captao de 45Ca2+ de maneira distinta quando expostos a aminopiridina ou KCl. Enquanto (PhTe)2 inibe a captao de clcio em todas as condies experimentadas, (PhSe)2, apresenta este efeito apenas quando incubado em condies basais ou sob a ao de aminopiridina. Ebselen, por sua vez, aumenta a captao de clcio em altas concentraes em condies basais e sob a ao de aminopiridina, porm, apresenta efeito inverso quando os sinaptossomas so despolarizados por KCl. Ebselen evitou a inibio da captao de 45Ca2+ in vitro provocada por cloreto de mercrio(HgCl) em sinaptossomas de crebro de rato em condies basais do ensaio, no entanto, ebselen no afetou a inibio da captao de glutamato in vitro por HgCl, indicando que ebselen pode atuar dependendo das protenas-alvo consideradas.Os compostos de mercrio, MeHg e HgCl, inibiram a captao de glutamato em córtex cerebral de ratos de 17 dias e ebselen reverteu somente o efeito do MeHg porm, no, o do HgCl. Disseleneto de difenila no alterou os parmetros avaliados na exposio de ambos os compostos de mercrio.Os compostos de mercrio estudados provocaram a morte celular das fatias de córtex, porm, ebselen protegeu as fatias dos efeitos lesivos provocados por MeHg e no pelo HgCl.
Resumo:
Cortical interneurons are characterized by their distinct morphological, physiological and biochemical properties, acting as modulators of the excitatory activity by pyramidal neurons, for example. Various studies have revealed differences in both distribution and density of this cell group throughout distinct cortical areas in several species. A particular class of interneuron closely related to cortical modulation is revealed by the immunohistochemistry for calcium binding proteins calbindin (CB), calretinina (CR) and parvalbumin (PV). Despite the growing amount of studies focusing on calcium binding proteins, the prefrontal cortex of primates remains relatively little explored, particularly in what concerns a better understanding of the organization of the inhibitory circuitry across its subdivisions. In the present study we characterized the morphology and distribution of neurons rich in calcium-binding proteins in the medial, orbital and dorsolateral areas of the prefrontal cortex of the marmoset (Callithrix jacchus). Using both morphometric and stereological techniques, we found that CR-reactive neurons (mainly double bouquet and bipolar cells) have a more complex dendritic arborization than CB-reactive (bitufted and basket cells) and PV-reactive neurons (chandelier cells). The neuronal densities of CR- and CB-reactive cells are higher in the supragranular layers (II/III) whilst PV-reactive neurons, conversely, are more concentrated in the infragranular layers (V/VI). CR-reactive neurons were the predominant group in the three regions evaluated, being most prevalent in dorsomedial region. Our findings point out to fundamental differences in the inhibitory circuitry of the different areas of the prefrontal cortex in marmoset
Resumo:
O Acidente vascular enceflico (AVE) considerado uma das mais importantes causas de morte e perda funcional no mundo. Poucas condies neurolgicas so to complexas e devastadoras, provocando dficits neurolgicos incapacitantes ou bito nos sobreviventes. As regies corticais so comumente afetadas por AVE, o que resulta em perda sensorial e motora. O estabelecimento dos padres neuropatolgicos em regies corticais, incluindo a rea somestsica, fundamental para a investigao de possveis intervenes teraputicas. No presente estudo, investigamos os padres de perda neuronal, microgliose, astrocitose, neurognese e os dficits funcionais no córtex somestsico primrio de ratos adultos, submetidos leses isqumicas focais, induzidas por microinjees de 40p Moles de endotelina-1 (ET-1). Foram utilizados 30 ratos (Rattus Norvegicus) da linhagem Wistar, adultos jovens, pesando entre 250-280g. Os animais foram divididos em grupos isqumicos (N= 21) e controle (N=9). Os mesmos foram perfundidos nos tempos de sobrevida de 1, 3 e 7 dias. Os animais do grupo de 7 dias foram submetidos testes comportamentais para avaliar a perda de funo sensrio-motora. Seces foram coradas pela violeta de cresila, citocromo oxidase e imunomarcadas para identificao neurnios (anti-NeuN), microglia ativada e no ativada (Iba-1), macrfagos/microglia ativados (ED-1), astrcitos (GFAP) e neuroblastos (DCX). As comparaes estatsticas entre os grupos foram feitas por anlise de varincia (ANOVA), um critrio com correo a posteriore de Tukey. Os animais isqumicos apresentaram dficits sensrio-motores revelados pela Escala Neurolgica de Bederson, Teste de Colocao da Pata Anterior e Teste do Canto. Microinjees de ET-1 induziram leso isqumica focal na rea somestsica primria com perda neuronal, astrocitose e microgliose progressivas principalmente nos tempos mais tardios. A colorao para citocromo oxidase revelou o campo de barris, mas, inesperadamente, marcou uma populao de clulas inflamatrias com caractersticas de macrfagos na regio isqumica. Houve aumento do nmero de neuroblastos, principalmente ao stimo dia, na zona subventricular do hemisfrio isqumico, em relao ao hemisfrio contralateral e animais controle. No houve migrao significativa de neuroblastos no córtex somestsico isqumico. Os resultados mostram que microinjees de ET-1 so um mtodo eficaz para induo de perda tecidual e dficits sensoriais no córtex somestsico primrio de ratos adultos. Tambm se evidencia que a zona subventricular influenciada por eventos isqumicos distantes e que populaes macrofgicas parecem aumentar o padro de expresso de citocromo oxidase. O referido modelo experimental pode ser utilizado em estudos futuros onde agentes neuroprotetores em potencial podem ser utilizados para minimizar as alteraes neuropatolgicas descritas.
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O metilmercrio (MeHg) um composto comprovadamente neurotxico cujos mecanismos degenerativos ainda no esto bem esclarecidos. No sistema nervoso central o MeHg seqestrado do interstcio preferencialmente por astrcitos diminuindo a carga de exposio neuronal. Estudos in vitro demonstraram que a prolactina (PRL) possui efeitos mitognicos sobre astrcitos, alm de regular a expresso de citocinas pr-inflamatrias. Este estudo teve por objetivo investigar efeitos protetores da prolactina sobre distrbios provocados por MeHg na viabilidade, morfologia, expresso de GFAP (glial fibrillary acidic protein), mitognese e liberao de interleucina-1 (IL-1 ) em cultivo glial de córtex cerebral de ratos neonatos focalizando as clulas astrogliais. A exposio a diferentes concentraes de MeHg (0,1, 1, 5 e 10 M) a diferentes intervalos de tempo (2, 4, 6, 18 e 24 h) ocorreu em cultivos com 10% de soro fetal bovino (SFB). Os resultados obtidos demonstraram diminuio progressiva de 20% e 62% da viabilidade celular aps exposio s concentraes de 5 e 10 M MeHg no tempo de 24 h, respectivamente, pelo mtodo do 3-4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difenil tetrazlio bromide (MTT) e distrbios na expresso e distribuio de GFAP. Diferentes concentraes de prolactina (0.1, 1 e 10 nM) foram adicionadas em meio sem soro fetal bovino (FBS) para avaliar sua ao proliferativa isoladamente. Esta ao foi confirmada com induo de mitognese em cerca de 4.5x em 18 h de observao na maior concentrao (10 nM PRL). Nestas condies (sem SFB) foram analisados os efeitos da associao de 1 nM PRL + 5M MeHg em teste de viabilidade, expresso de GFAP, morfologia celular, ndice mittico e liberao de IL-1 com o objetivo de estudar possveis efeitos citoprotetores deste hormnio. A PRL atenuou os distrbios provocados pelo MeHg, aumentando a viabilidade em 33%, a expresso de GFAP, proliferao celular (4x) e atenuando os distrbios morfolgicos, incluindo picnose nuclear e lise. Adicionalmente, a PRL induziu amplificao da liberao de IL1 quando associada ao MeHg. Estes achados confirmam a hiptese de que a PRL possa atuar como um agente citoprotetor em cultura primria de glia e particulamente em astrcitos, ao esta aditiva aos seus efeitos mitognicos.
Resumo:
O perodo crtico de plasticidade do córtex cerebral a etapa do desenvolvimento ps-natal do sistema nervoso onde os circuitos neurais so mais suscetveis mudanas influenciadas por informaes oriundas do ambiente. No córtex pr-frontal de humanos, responsvel pelas funes executivas, o perodo crtico de plasticidade estende-se desde o nascimento at o final da adolescncia e incio da vida adulta. Isto definido, entre outros fatores, pelo amadurecimento das redes perineuronais, uma estrutura especializada da matriz extracelular, localizada em volta do corpo celular e dendritos proximais de interneurnios inibitrios. O objetivo desta pesquisa foi verificar o efeito do ambiente em etapas distintas da adolescncia sobre a estrutura e a funo do córtex pr-frontal de ratos e a distribuio da expresso espacial e temporal das redes perineuronais sob estas condies. As funes executivas foram avaliadas atravs de testes comportamentais medindo a capacidade de memria operacional e a inibio comportamental. Observamos que estmulos estressores crnicos imprevisveis provocam alteraes no perodo crtico de plasticidade do córtex pr-frontal e, consequentemente, influenciam o amadurecimento das funes executivas. Observamos tambm que o estresse crnico induz modificao no padro de amadurecimento das redes perineuronais no córtex pr-frontal. Estes resultados indicam a vulnerabilidade do córtex pr-frontal de ratos adolescentes para os efeitos negativos de estmulos ambientais estressores sobre o perodo crtico de plasticidade.
Resumo:
INTRODUO: A deglutio um processo fisiolgico complexo que acontece por uma sequncia motora automtica, regulada por um complicado mecanismo neuromotor e neuromuscular que iniciado de maneira consciente e resultado da integridade anatmica e funcional de diversas estruturas faciais. de extrema importncia para a nutrio do organismo como um todo. Um dos maiores desafios no campo das cincias identificar os substratos neurais de comportamentos fisiolgicos, incluindo esse processo de deglutio. O desenvolvimento da tecnologia em neuroimagem funcional nos ltimos anos est provocando um rpido avano no conhecimento de funes cerebrais, o que resultou numa exploso de novos achados em neurocincia. OBJETIVO: Mapear as regies de ativao cerebral durante o fenmeno da deglutio por meio do exame de ressonncia magntica funcional. MTODO: Participaram do estudo quatro indivduos do sexo feminino, com idade entre 18 e 30 anos, sem alteraes neurolgicas, estruturais e alimentares. Aps a aprovao da Instituio (Clnica Lobo), do Comit de tica e Pesquisa do Instituto de Cincias da Sade (ICS) e a aprovao escrita de cada paciente atravs do termo de consentimento livre e esclarecido, foram submetidos a quatro provas deglutrias, utilizando a tcnica de ressonncia magntica funcional. RESULTADOS: Foi possvel a determinao da ativao dos hemisfrios cerebrais e cerebelares e as especificas reas que os compem. Mesmo com uma amostragem pequena, os resultados das anlises individuais mostraram padres de acordo com a literatura, conjuntamente com dados novos. DISCUSSO: O cerebelo responsvel pela coordenao da ao motora e manuteno da harmonia dos movimentos, posio e equilbrio do bolo alimentar; o bolbo raquidiano juntamente com o tronco cerebral constitui o centro de atividades reflexas que controla funes ou respostas orgnicas automticas como a deglutio; o mesencfalo a parte do encfalo que coordena a informao visual; o tlamo encaminha quase todo o tipo de informao sensorial para as zonas especficas do córtex cerebral; o hipotlamo, importante na experimentao das sensaes de prazer, regula as funes homeostticas do corpo, gustao, olfao, salivao, interagindo com o sistema nervoso autnomo e o sistema lmbico est ligado ao controle e direo das reaes emocionais, sob a ao da amgdala, no processamento de odores e no armazenamento de contedos da memria, aqui atravs do hipocampo. CONCLUSO: O ato de deglutir um processo complexo, ativando muitas reas cerebrais, dentre elas podemos destacar a gustativa, mental/visual e a olfativa e que iniciado muito antes dos processos mecnicos envolvidos, conforme demonstrado pelas reas corticais e subcorticais ativadas. A rea olfativa foi a mais notadamente destacada nas imagens colhidas pela Rmf.
Resumo:
Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
Resumo:
O consumo de etanol durante a gestao um grave problema de sade pblica. Durante o desenvolvimento, o sistema nervoso especialmente susceptvel aos efeitos txicos do etanol e a exposio ao etanol durante este perodo pode gerar um amplo espectro de distrbios neurocomportamentais, sendo o mais frequente, a hiperatividade. Recentemente, estudos tm sugerido que distrbios na plasticidade neuronal podem estar relacionados com a hiperatividade. Os inibidores de PDE so drogas que agem impedindo a degradao de segundos mensageiros celulares como AMPc e GMPc, mantendo a ativao de protenas quinases e de fatores de transcrio como o CREB, levando a expresso de genes relacionados plasticidade. Neste trabalho, avaliamos atravs do teste de campo aberto se a administrao de Vinpocetina ou Rolipram (inibidores de PDE) seria capaz de amenizar ou reverter a hiperatividade de camundongos Suos expostos ao etanol no perodo correspondente ao terceiro trimestre de gestao humana. Para tanto, foram realizadas duas etapas: na primeira etapa, durante o perodo neonatal, os animais receberam injees intraperitoneais de etanol (5g/Kg em soluo salina a 25%, no 2, 4, 6 e 8 dias de vida ps-natal - PN2 a PN8) ou de salina, e 4 horas antes do teste comportamental no campo aberto (10 min), em PN30, receberam Vinpocetina (10mg/Kg ou 20mg/Kg diludas em DMSO ip) ou somente DMSO ip. Na segunda etapa, os animais foram expostos ao etanol ou salina no perodo neonatal nas mesmas condies da primeira etapa e no dia do teste comportamental receberam Rolipram (0,5mg/Kg diludas em DMSO ip ou somente DMSO ip). Posteriormente aos testes, foram coletados o córtex cerebral frontal e o hipocampo dos animais para avaliao dos nveis de AMPc. Os resultados comportamentais indicam que somente o tratamento com Vinpocetina (20mg/Kg) reverteu a hiperatividade de camundongos expostos ao etanol, resultado que no foi observado com o tratamento com Rolipram. Desta forma, a dosagem dos nveis de AMPc foi realizada apenas nos animais que receberam injeo de Vinpocetina (20mg/Kg). A exposio neonatal ao etanol reduziu significativamente os nveis de AMPc no córtex e no hipocampo. O tratamento com Vinpocetina gerou um aumento nos nveis de AMPc no córtex e restaurou estes nveis no hipocampo. Nossos resultados sugerem que a reverso da hiperatividade pelo tratamento com Vinpocetina pode estar associada ao aumento da plasticidade neural induzida por esta droga.
