Effects of Soft Denture Liners on L929 Fibroblasts, HaCaT Keratinocytes, and RAW 264.7 Macrophages

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Expression of inducible nitric oxide synthase in macrophages inversely correlates with parasitism of lymphoid tissues in dogs with visceral leishmaniasis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Expression of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) in Macrophages, Fibroblasts, and Endothelial Cells in Pterygium Treated with 5-Fluorouracil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Anti-leishmanial effects of purified compounds from aerial parts of Baccharis uncinella C. DC. (Asteraceae)

Species of Baccharis exhibit antibiotic, antiseptic, wound-healing, and anti-protozoal properties, and have been used in the traditional medicine of South America for the treatment of several diseases. In the present work, the fractionation of EtOH extract from aerial parts of Baccharis uncinella indicated that the isolated compounds caffeic acid and pectolinaringenin showed inhibitory activity against Leishmania (L.) amazonensis and Leishmania (V.) braziliensis promastigotes, respectively. Moreover, amastigote forms of both species were highly sensible to the fraction composed by oleanolic + ursolic acids and pectolinaringenin. Caffeic acid also inhibited amastigote forms of L. (L.) amazonensis, but this effect was weak in L. (V.) braziliensis amastigotes. The treatment of infected macrophages with these compounds did not alter the levels of nitrates, indicating a direct effect of the compounds on amastigote stages. The results presented herein suggest that the active components from B. uncinella can be important to the design of new drugs against American tegumentar leishmaniases.

The effect of phospholipase A2 from Crotalus durissus collilineatus on Leishmania (Leishmania) amazonensis infection

In this study, the effect of phospholipase A2 (PLA2) derived from Crotalus durissus collilineatus was evaluated in vitro and in vivo on experimental cutaneous leishmaniasis. The promastigote and amastigote forms treated with PLA2 presented increased growth rate. In vivo studies showed that PLA2-treated Leishmania (Leishmania) amazonensis promastigotes increased the size of lesions in BALB/c mice, and histopathological analysis showed numerous necrotic regions presenting a higher density of polymorphonuclear, mononuclear, and amastigote cells. Additionally, infected macrophages treated with PLA2 were able to generate prostaglandin E2 (PGE2). Cytokine quantification showed that the supernatant from infected macrophages presented moderate and high amounts of IL-2 and IL-10, respectively. However, in PLA2-treated infected macrophages, suppression of IL-2 levels occurred, but not of IL-10 levels. Observation also revealed that both the supernatant and lysate of L. (L.) amazonensis promastigotes exhibited PLA2 activity, which, in the presence of dexamethasone, showed no reduction in their activities; while glucocorticoid maintained the ability of promastigote forms to infect macrophages, which presented values similar to controls. In conclusion, the results indicate that PLA2 may be a progression factor for cutaneous leishmaniasis, since the PLA2 effect suppressed IL-2 levels and generated PGE2, an inflammatory lipid mediator.

Tempo de migração dos macrófagos em matrinxã, Brycon amazonicus, por meio da técnica de inoculação de leveduras Saccharomyces cerevisiae

Na aquicultura são utilizados análises da ativação e incremento da migração de macrófagos, com intuito de verificar a capacidade imunológica inespecífica dos peixes frente a um desafio. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi determinar o tempo de migração de monócitos/macrófagos para a cavidade peritoneal em matrinxã, Brycon amazonicus, por meio da técnica de inoculação de leveduras Saccharomyces cerevisiae, e verificar as possíveis alterações dos parâmetros hematológicos após o estímulo. Foram utilizados 30 matrinxãs com peso médio de 101,55 ± 24,50 g e comprimento médio de 19,75 ± 1,72 cm. Os tempos de inoculação utilizados foram 2, 4, 8 e 12 horas, sendo utilizados 6 animais por tempo. Após os períodos de incubação (2, 4, 8 e 12 horas), os exemplares foram anestesiados e alíquotas de sangue foram coletadas por punção do vaso caudal, para a análise: número total de células, contagem diferencial e total dos leucócitos e contagem total de trombócitos, hematócrito, taxa de hemoglobina e índices hematimétricos (VCM, HCM e CHCM). Os resultados mostram que a capacidade fagocítica do macrófago não apresentou diferenças significativas entre os tempos experimentais. Com relação ao índice fagocítico, o tempo de 2 horas representa o tempo em que os macrófagos fagocitaram maior número de leveduras com diferenças significativas em relação aos outros tempos experimentais, indicando que este tempo (2 horas) de incubação foi suficiente para a migração e ativação máxima dos macrófagos da cavidade peritoneal, da espécie estudada. Os valores do número de eritrócitos apresentaram diferenças entre os tempos de incubação. Entretanto, os valores dos outros parâmetros hematológicos não apresentaram diferenças significativas.

Intraoperative topical administration of mitomycin C, in different concentrations, on the cicatrization of mioplasties of the dorsal rectus of rabbits

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação macroscópica, microscópica e histomorfométrica do tecido cicatricial pós-cirúrgico de eqüinos submetidos a duas técnicas de neurectomia digital

Avaliou-se macro e microscopicamente o tecido cicatricial pós-operatório de eqüinos submetidos a duas técnicas de neurectomia digital: guilhotina (TG) e stripping (TS). Decorridos 14 meses das cirurgias, foram colhidas 32 amostras de tecido cicatricial em quatro éguas, que tiveram os membros submetidos a ambas as técnicas. À macroscopia, verificaram-se as dimensões da cicatriz do coto proximal e a distância entre os cotos proximal e distal. À microscopia, foi quantificada a proporção de tecido nervoso regenerado por meio de histomorfometria. Não houve diferença nas dimensões do tecido cicatricial, contudo a distância entre cotos foi 5,6 vezes maior na TS (P<0,001). Histologicamente, observou-se a presença de tecido conjuntivo frouxo e denso, macrófagos e fibras nervosas delgadas em ambas as técnicas cirúrgicas. Estruturas nodulares, compostas por fascículos nervosos, foram visualizadas em 56,2% (9/16) das amostras colhidas em nervos submetidos à TS. As porcentagens médias de tecido nervoso no tecido cicatricial foram de 0,31% na TG e 2,6% na TS (P<0,001). Concluiu-se que o retorno à sensibilidade nervosa deve demorar mais a ocorrer após a TS, devido à maior distância entre cotos. A maior proporção de tecido nervoso sugere que essa técnica favorece a regeneração nervosa.

Aspectos morfométricos da cicatrização do cólon descendente de eqüinos submetidos a enterorrafias aposicionais com poliglactina 910 e com cianoacrilato

Foi realizado estudo morfométrico do cólon descendente de 15 eqüinos hígidos, nove fêmeas e seis machos, submetidos a enterorrafias aposicionais com fio de poliglactina 910 ou com cianoacrilato. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos de três animais cada e sacrificados aos três, sete, 14, 35 e 70 dias de pós-operatório para colheita dos segmentos intestinais operados e posterior processamento histológico de rotina. A análise morfométrica foi feita em microscópio óptico adaptado a um sistema de análise de imagens, onde se quantificou o infiltrado inflamatório, mediante contagens de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos, linfócitos e plasmócitos, não sendo observadas diferenças (P>0,05) entre as enterorrafias. Houve diferenças significativas entre os dias de pós-operatório para as contagens de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos e linfócitos. Também se mensuraram as espessuras das regiões operadas (cicatriz) e das áreas contíguas não operadas (controle), registrando-se diferenças entre os dias de pós-operatório e as regiões (P<0,05), mas não entre as enterorrafias. O fio de poliglactina 910 e o cianoacrilato apresentam a mesma eficácia para serem usados em enterorrafias aposicionais do cólon descendente de eqüinos.

Detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by nested PCR in Colombian cattle

Fifteen cases of viral meningoencephalitis in Colombian cattle were tested by nested PCR analysis for the detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5). All fatal cases had shown severe neurological signs and had occurred following natural outbreaks of the disease. The neurological infection was histologically characterized by mild to moderate inflammatory changes in the brain and cerebellum, including meningitis, mononuclear perivascular cuffing, gliosis, haemorrhage, and the presence of Gitter cells (macrophages) accompanying large areas of malacia. No intranuclear inclusion bodies were seen in any of the cases. Results from BoHV-5 molecular extraction analyses showed there were five positive cases thus confirming the presence of the virus in Colombia.

Inflammatory responses of Nile tilapia Oreochromis niloticus to Streptococcus agalactiae: effects of vaccination and yeast diet supplement

This study evaluated the effects of dietary supplementation with 0.3% Saccharomyces cerevisiae yeast cell wall and of vaccination against Streptococcus agalactiae on the cellular component of acute inflammation induced in the coelomic cavity of Nile tilapia Oreochromis niloticus and on survival of the fish after challenge. A total of 84 tilapia of mean (+/- SD) weight 125.0 +/- 1.5 g were distributed among twelve 310 l fiberglass tanks according to a 2 x 2 x 3 factorial design in the following manner: with and without supplementation; 2 stimulations (oily solution without S. agalactiae vaccine and vaccination); 15 d later all fish were intracoelomically challenged with 10(8) CFU ml(-1) of a homologous strain of S. agalactiae, and evaluated after 6, 24 and 48 h, with 7 replicates. The fish received the non-supplemented or supplemented diet for a total of 77 d. The vaccination was performed on the 60th day, intracoelomically, as a single injection of 0.5 ml of the vaccine containing 10(8) CFU ml(-1). Fifteen days later, all the fish were challenged with S. agalactiae by means of an intracoelomic inoculation of 10(8) CFU ml(-1). No mortality was observed among the supplemented fish. The fish that were fed the non-supplemented diet and immunized with the bacterium presented a mortality rate of 28.5%. Among the non-supplemented and non-immunized fish, the mortality rate was 38.09%. Supplementation, in both vaccinated and non-vaccinated fish, induced larger accumulations of thrombocytes, lymphocytes and macrophages at the inflammatory focus. The results suggest that supplementation with 0.3% yeast cell wall, in both vaccinated and non-vaccinated fish, improved the inflammatory response of the fish and protected against the challenge. Vaccination increased the defense response, but the effect was stronger when associated with supplementation with S. cerevisiae.

Vitamin C and endogenous cortisol in foreign-body inflammatory response in pacus

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com vitamina C no aumento da atividade de macrófagos e células gigantes multinucleadas (CGM), em pacus mantidos em duas densidades de estocagem. O experimento foi realizado em parcelas subdivididas, em arranjo fatorial 2x2x3 com: 0 e 500 mg kg-1 de vitamina C; densidade de estocagem de 5 e 20 kg m-3; e tempos de avaliação de 3, 6 e 12 dias após o implante subcutâneo (DPI) de lamínulas de vidro. Foram determinados o número de macrófagos e de CGM, bem como os níveis de cortisol e glicose no plasma. O número de macrófagos e de CGM com 2 a 5 núcleos foi significativamente maior nos peixes suplementados com vitamina C, à densidade 5 kg m-3, aos 3 DPI, em relação aos não suplementados. Constatou-se menor quantidade de macrófagos e CGM em peixes com baixa concentração plasmática de cortisol. A suplementação com 500 mg de vitamina C por quilograma de ração beneficia a atividade de macrófagos em inflamações do tipo corpo estranho, e a elevada concentração de cortisol circulante tem efeito supressor nesta resposta.

Immune response pattern of the popliteal lymph nodes of dogs with visceral leishmaniasis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Inflammation induced by inactivated Aeromonas hydrophila in Nile tilapia fed diets supplemented with Saccharomyces cerevisiae

The inflammatory response and hernatological parameters among Nile tilapia (Oreochromis niloticus) supplemented with Saccharomyces cerevisiae were evaluated six and 24 h after inoculation with inactivated Aeromonas hydrophila into the swim bladder. Six groups were formed (n = 10 each): G1 was treated with non-supplemented feed+injection with 0.65% saline solution; G2 with non-supplemented feed+ inoculation with A. hydrophila: G3 with feed containing 2% yeast+ injection with saline; G4 with feed containing 2% yeast + inoculation with A. hydrophila: G5 with feed containing 0.3% cell wall + injection with saline: and G6 with feed containing 0.3% cell wall + inoculation with A. hydrophila. In the groups inoculated with bacteria, the responses were more intense (P<0.05) than in those injected with saline. The groups receiving supplement that were inoculated with A. hydrophila accumulated a greater total number of cells at the lesion site (P<0.05) than did the non-supplemented groups, after six and 24 h. The groups receiving cell wall presented greater total accumulation of cells (P<0.005) that did those receiving yeast. The differential count showed that there were significantly greater number of thrombocytes (P< 0.05) and lower number of neutrophils, macrophages and lymphocytes (P<0.05) in the groups that received supplement, after 6 and 24 h, in relation to the non-supplemented groups. The values in the erythrocyte count, hemoglobin concentration and blood measurement indices did not differ statistically. The variation in circulating thrombocyte and leukocyte counts suggests that the inflammatory stimulus caused recruitment from reserve compartments to the blood. The groups that received yeast or yeast cell wall supplements presented increased nonspecific acute inflammatory response, thus suggesting that this has a beneficial effect on the immunological defense system. Published by Elsevier B.V.

VISCERAL LEISHMANIASIS IN A CAPTIVE CRAB-EATING FOX CERDOCYON THOUS

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)