Freezing of stallion epididymal sperm

Inseminations with frozen-thawed epididymal sperm have resulted in low-pregnancy rates of mares. If fertility of epididymal sperm could be improved, it would help to preserve genetic material from stallions that have suffered severe injuries, been castrated or have died. The aim of the present study was to investigate the effect of different extenders and pre-freezing addition of capacitation media on freezability of epididymal sperm and on storage at 5 degrees C for 24 h. In experiment 1, epididymal sperm samples were diluted and subsequently frozen with three different extenders: Botu-Crio((R)), EDTA-Lactose and INRA-82. Motility analysis using computer assisted sperm analyzer (CASA) demonstrated better motility for sperm in Botu-Crio((R)) than in the other extenders; EDTA-Lactose yielded better motility than INRA-82 on most evaluated parameters. There was no difference in membrane integrity among the studied extenders. From 18 inseminated mares, 12 (66%) were pregnant 15 days after AI with frozen-thawed epididymal sperm showing that Botu-Crio((R)) was able to maintain the fertility potential. In experiment 2, the effect of incubation of epididymal sperm before freezing in three capacitation media (Fert Talp, Sperm Talp, Talp + Progesterone), seminal plasma, or control was tested. Based on post-thaw motility evaluation by CASA, samples incubated in Sperm Talp showed better motility values. There were no differences in plasma or acrosomal membranes or in mitochondrial potential among groups. We concluded that Botu-Crio((R)) was better than the other extenders in the ability to preserve epididymal sperm and that pre-freeze addition of Sperm Talp was also beneficial. (c) 2008 Published by Elsevier B.V.

The Use of Response Surface Methodology in Optimization of Lactic Acid Production: Focus on Medium Supplementation, Temperature and pH Control

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Factors affecting rhamnolipids production by Pseudomonas aeruginosa LBI

This paper presents the results from study investigating the capacity of Pseudomonas aeruginosa LBI growing on several carbon (Hydrophilic substrate) and nitrogen sources. The carbon source (2016) studied were: glycerol, manitol, fructose, glucose, lactose and the nitrogen sources (2; 3; 4 and 5016) were: NaNO3, NH4NO3, (NH4)(2)SO4 and (NH2)(2)CO. At the 96 h of fermentation, the medium with glycerol as a carbon source reached 7.9 g/L of rhamnolipids and 1. 2 g/L cellular protein. The surface tension reduction was 38.46 % for glycerol as a carbon source. The NaNO3 at 3% was the best concentration for rhamnolipids production (7.35 g/L) and cellular protein (1.12 g/L). The influences of metal ions [FeSO4.7H(2)O (0.001g/L, 0.005 g/L and 0.1 g/L) and MgSO4.7H(2)O (0.001 g/L, 0.005 g/L and 0.1 g/L)] on ramnolipids production were studied. Fe2+ had a negative influence on the studied concentrations while Mg2+ had a positive influence when its concentration was increased.

Potentiometric determination of captopril in pharmaceutical formulations

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Spectrophotometric determination of diclofenac in pharmaceutical preparations assisted by microwave oven

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Influência do fotoperíodo no consumo alimentar, produção e composição do leite de ovelhas Bergamácia

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do fotoperíodo sobre o consumo alimentar, produção e composição do leite (gordura, proteína, lactose, sólidos totais) e número de células somáticas de sete ovelhas da raça Bergamácia, submetidas a um fotoperíodo considerado curto (12 horas luz:12 horas escuro), e oito ovelhas da mesma raça, a um fotoperíodo longo (18 horas luz:6 horas escuro), durante as últimas quatro semanas de gestação e três meses de lactação. Para comparação, foi utilizado o teste t para duas amostras independentes. O consumo alimentar avaliado, diariamente, para cada baia com duas ovelhas, não diferiu entre os tratamentos. No fotoperíodo curto, o consumo médio diário foi de 4,48 kg e, no fotoperíodo longo, de 4,40 kg. Não foi observada diferença significativa entre os fotoperíodos, para a produção de leite e teores de proteína, lactose e sólidos totais, quando considerados os 84 dias de lactação. No fotoperíodo curto, a porcentagem média de gordura foi 5,57%, índice superior ao obtido no fotoperíodo longo, de 5,21%. Na análise dos resultados, a cada semana, notou-se que na segunda e na quarta semanas de lactação, a produção de leite foi maior nas ovelhas do fotoperíodo longo. O número de células somáticas não diferiu entre os fotoperíodos e manteve-se baixo por toda a lactação. O maior número de horas de luz estimula a produção de leite no primeiro mês de lactação, principalmente na quarta semana, e as porcentagens de gordura e sólidos totais são menores nos períodos de maior produção de leite.

COMPOSIÇÃO, PERFIL NITROGENADO E CARACTERÍSTICAS do LEITE CAPRINO (SAANEN): REGIÃO SUDESTE, BRASIL

Durante um ano, trabalhou-se com o leite de conjunto produzido por três grupos distintos de cabras Saanen, perfazendo um total variável entre 44 e 56 animais em lactação e um total de 179 amostras analisadas, nas quais determinou-se a composição química, o perfil nitrogenado e as principais características físico-químicas. Para a composição geral, os valores determinados foram: 3,27% para proteína total, 3,74% para gordura, 4,35% para lactose, 0,74% para cinzas e 88,49% para água. O perfil nitrogenado distribuiu-se em: 3,27% para proteína bruta (PB), 2,97% para proteína verdadeira (TP), 2,43% para a fração caseínas (C), e 0,84% para as proteínas do soro (PS), incluindo 0,30% para a fração nitrogenada não protéica (NNP). As características determinadas foram: 1,0324 para a densidade a 15ºC, 6,65 para o pH a 25ºC, 16,11ºD para a acidez, 0,172 g% para o teor de cloretos, -0,574ºH para o ponto de congelamento, 11,51% para sólidos totais (ST), 7,77% para sólidos desengordurados (SD), 12,45% para o extrato seco total (EST) calculado e 8,90% para o extrato seco desengordurado (ESD), também calculado.

Qualidade e quantidade do leite produzido por cabras da raça Saanen submetidas a estresse por três dias consecutivos

Estudou-se o efeito do estresse fisiológico, via administração pontual de ACTH, sobre os níveis de cortisol e a quantidade e qualidade do leite produzido. Para tanto, 12 cabras da raça Saanen foram alocadas em dois grupos experimentais: o grupo ACTH recebeu 0,6 UI de ACTH/kg PV, e o grupo placebo recebeu solução placebo. A produção de leite, os percentuais de proteína, gordura e lactose e a contagem de células somáticas (CCS) do leite foram mensurados antes, durante e após a administração de ACTH e do placebo. Simultaneamente à administração de ACTH e placebo por três dias consecutivos, foram realizadas colheitas de sangue para mensuração dos teores de cortisol. Nos tempos -30 e zero, ambos os grupos apresentaram concentrações basais de cortisol. O aumento nos níveis de cortisol foi significativo nos tempos 60min (grupo ACTH: 59,00±5,70 e grupo placebo: 5,23±1,37ng/mL) e 120min (grupo ACTH: 47,96±9,72 e grupo placebo: 4,38±1,14ng/mL), pois a concentração de cortisol foi maior no grupo ACTH. Os valores retornaram ao basal no tempo 300min. Não houve diferenças na produção leiteira entre os grupos ACTH e placebo, tampouco de proteína, gordura, lactose e CCS do leite dos grupos, portanto o estresse induzido por três dias consecutivos não trouxe prejuízos à produção.

Substituição do farelo de soja pela farinha de glúten de milho na alimentação de cabras leiteiras

Realizou-se um experimento com cabras Saanen, primíparas, pesando em média, 50 kg, alojadas em baias individuais de 3 m², objetivando avaliar a substituição da proteína do farelo de soja (FS) pela proteína da farinha de glúten de milho (FGM), na produção e composição do leite, consumo voluntário e níveis de uréia plasmática. O delineamento experimental foi o triplo quadrado latino 4x4, com quatro períodos de 21 dias, sendo 14 dias de adaptação à dieta e sete dias para colheita das amostras. As cabras foram alimentadas e ordenhadas pela manhã e tarde. Os níveis de substituição estudados foram 0, 10, 30 e 50% de FGM (base na proteína bruta). A substituição do farelo de soja pela farinha de glúten de milho não afetou o consumo (kg/dia e %PV) de matéria seca, proteína bruta e fibra em detergente ácido, mas houve efeito quadrático, para o consumo de fibra em detergente neutro (kg/dia e % PV). Houve efeito sobre os níveis de uréia plasmática (UP), que foram inferiores para os menores níveis de substituição, sendo os maiores valores de UP observados para o tratamento que possuía somente FS. A produção de leite decresceu linearmente com a inclusão da farinha de glúten de milho. Os níveis de substituição resultaram em decréscimos lineares na produção de gordura (kg/dia), no teor de gordura do leite (%) e no teor de sólidos totais. Houve efeito quadrático para produção de lactose (kg/dia), observando-se o menor valor estimado para o nível de substituição de 31,6%. Não foi observado efeito sobre a produção de proteína bruta no leite, cujo valor médio foi de 0,083 kg/dia. Os teores de proteina bruta, lactose e sólidos totais não sofreram efeito dos níveis de substituição, sendo os valores médios percentuais de 2,98; 4,35 e 11,51%, respectivamente.

Produção e composição do leite de vacas de quatro grupos genéticos submetidas a dois manejos alimentares no período de lactação

O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção e composição do leite de vacas de corte das raças Charolês (C), Nelore (N), mestiças CN filhas de touros C e mestiças NC filhas de touros N, mantidas em pastagem nativa e submetidas a diferentes manejos no pré-desmame: suplementadas com farelo de arroz integral (0,7% do peso vivo) e que desmamaram aos 42 ou 63 dias pós-parto, ou não suplementadas e que desmamaram aos 63 dias. A idade das vacas variou de 3 a 12 anos, sendo agrupadas em quatro classes: primíparas, jovens, adultas e velhas. Os dados foram submetidos à análise de variância, cujo modelo estatístico incluiu os efeitos de manejo, grupo genético e idade da vaca, período e as interações entre esses fatores. Os teores de lactose e gordura não foram influenciados pelos fatores estudados. Houve interação significativa entre idade da vaca e período para a produção de leite e entre manejo e idade da vaca para o teor de proteína. Vacas suplementadas apresentaram maior produção de leite (3,85 contra 3,25 L/dia), teor de extrato seco total - EST (12,18 contra 11,83%) e teor de extrato seco desengordurado - ESD (8,75 contra 8,57%). A produção de leite decresceu com o avanço do período de lactação, sendo a queda mais acentuada nas vacas não suplementadas. Vacas CN produziram mais leite (4,17 L/dia) do que as puras, não diferindo das NC (3,76 L/dia). Vacas N apresentaram produção de leite similar (3,76 L/dia) às C (3,11 L/dia). No entanto, as primeiras apresentaram leite com melhor qualidade, incluindo proteína (3,16 contra 2,86%), EST (12,52 contra 11,46%) e ESD (8,87 contra 8,49%). Vacas adultas apresentaram maior teor de ESD, seguidas das vacas jovens, das primíparas e das velhas, com valores de 8,86; 8,62; 8,62; e 8,54%, respectivamente.

Consumo e digestibilidade total dos nutrientes e produção e composição do leite de vacas alimentadas com teores crescentes de proteína bruta na dieta contendo cana-de-açúcar e concentados

Objetivou-se avaliar o efeito de teores crescentes de PB na MS total da dieta (11,5; 13,0; 14,5 e 16,0%) sobre os consumos e a digestibilidade total dos nutrientes e a produção e composição do leite de vacas leiteiras no terço inicial da lactação. O experimento foi constituído de quatro períodos experimentais de 15 dias, sete para adaptação dos animais à dieta e oito para coleta de dados. Foram utilizadas oito vacas, manejadas em cochos individuais, distribuídas em dois quadrados latinos balanceados 4 × 4. Utilizou-se concentrado à base de farelo de algodão e fubá de milho (40%) e, como volumoso, cana-de-açúcar corrigida com 1% de uréia + sulfato de amônio (9:1), na proporção de 60% (% MS). Os consumos médios diários de nutrientes, exceto EE e CNF, diferiram à medida que os teores de PB da dieta aumentaram. Os teores de PB na dieta não afetaram os coeficientes de digestibilidade aparente total dos nutrientes. A produção de leite corrigida ou não para 3,5% de gordura e seus componentes (gordura, PB e lactose), expressa em g/dia, e o nitrogênio uréico no leite (NUL) tiveram efeito linear crescente, enquanto a eficiência de utilização de N sofreu efeito linear negativo dos teores de PB da dieta. A dieta com 16% PB resultou em valores numericamente maiores de consumo e produção do leite e de seus componentes se comparada às dietas com menores teores de PB.

Fertilidade do sêmen eqüino diluído, resfriado e transportado

Objetivou-se neste experimento estudar o efeito do transporte de sêmen equino, entre haras, sobre a fertilidade de éguas inseminadas. Setenta e seis fêmeas da raça Mangalarga Marchador foram distribuídas, ao acaso, com número desigual de repetições, para se estudarem os efeitos do sêmen in natura, transportado ou não, e do sêmen diluído, resfriado e transportado, sobre a fertilidade de éguas e diferentes características reprodutivas. O sêmen foi diluído no diluidor lactose-gema de ovo sem glicerina. As fêmeas foram inseminadas, em dias alternados, com sêmen de apenas um garanhão, com volumes/dose inseminante variáveis dependendo do número de fêmeas a serem inseminadas por dia com determinado ejaculado. Utilizou-se para o transporte do sêmen um contêiner especialmente projetado para este fim (MSP-1). As taxas de concepção ao primeiro ciclo e totais, a eficiência de prenhez, o número de ciclos/égua, ciclos/égua gestante, ciclo/prenhez e prenhez/ciclo, o número de IA/égua, o número de IA/égua gestante e o número de IA/égua vazia não foram influenciados pelos tratamentos. O diluidor de lactose gema, modificado pela retirada do glicerol de sua formulação, constitui uma opção para a diluição do sêmen a ser resfriado e transportado. O suceso do transporte do sêmen, diluído e resfriado, a pequenas distâncias, por período de tempo curto, depende mais de um bom diluídor que de um sofisticado contêiner de transporte.

Production of transgalactosylated oligosaccharides (TOS) by galactosyltransferase activity from Penicillium simplicissimum

Ingestion of transgalactosylated oligosaccharides (TOS) and other non-digestible oligosaccharides (NDOs) induces a significant increase in Bifidobacterium, Lactobacillus and some desirable species of Streptococcus populations in the gut of human and other animals (prebiotic effect). This change in the intestinal flora is responsible for several beneficial physiological effects such as a decrease of putrefactive products in the feces, lower blood cholesterol content, higher Ca2+ absorption, a smaller loss of bone tissue in ovariotomized female rats and a lower incidence of colon cancer. beta-Galactosidase from Penicillium simplicissimum, a strain isolated from soil, showed high galactosyltransferase activity when incubated with a highly concentrated lactose solution. Optimum pH and temperature ranges for hydrolytic activity were 4.0-4.6 and 55-60 degrees C, respectively, for a lactose concentration of 5.0% (w/v). Maximal galactosyltransferase activity was obtained at pH 6.5 and 50 degrees C and TOS synthesis was positively associated with lactose concentration in the reaction medium. Thus, when 50 ml of a 60% (w/v) lactose solution was incubated with 26.6 U of beta-galactosidase under the best pH and temperature conditions for transferase activity, a final product with 30.5% TOS (183 mg ml(-1)), 27.5% residual lactose and 42.0% monosaccharides was obtained. (C) 1999 Elsevier B.V. Ltd. All rights reserved.

Avaliação de uma Técnica de Diluição e Transporte de Sêmen Eqüino, para as Condições Brasileiras

Ninety-seven Mangalarga Marchador mares were allocated in a randomized experimental design, with different number of replicates per treatments. The objective of this experiment was to study the effect of raw (T3) or diluted, cooled semen transported to the breeding farms 1 (T1) and 3 (T2), on mare fertility and different aspects of reproductive efficiency. The mares were inseminated, with semen of only one stallion (Farm 2), on alternate days using different inseminating volumes, according to number of inseminated mares per day using only one ejaculate. For transportation, semen diluted in a lactose-egg yolk modified extender and the MSP-2 container were used. There was no difference among treatments in relation to conception rates of mares inseminated with raw or diluted, cooled and transported semen. Regardless of the farm, the total fertility obtained with cooled semen was 80% (52/65). The following variables were not affected by the treatments: cycles/mare, cycles/pregnant mare, cycles/pregnancy, pregnancy/cycle, number of inseminations/mare, number of inseminations/pregnant mare, number of inseminations/open mare and efficiency of pregnancy. However, the breeding farm had an effect on water and semen temperature in the container, time between collection and insemination, according to time and distance covered. Based on the results, cooling and transporting equine semen, using an extender, lactose-egg yolk without glycerine and the MSP-2 container should be recommended for short distances. The use of raw semen immediately after collection is also recommended.

Haemagglutination induced by Bordetella pertussis filamentous haemagglutinin adhesin (FHA) is inhibited by antibodies produced against FHA(430-873) fragment expressed in Lactobacillus casei

Filamentous haemagglutinin adhesin (FHA) is an important virulence factor from Bordetella pertussis related to the adhesion and spread of the bacteria through the respiratory tract. Three distinct domains have been characterized in mature FHA, and among them, the FHA(442-863) fragment was suggested to be responsible for the heparin-binding activity. In this study, we cloned the gene encoding the HEP fragment (FHA(430-873)) in a Lactobacillus casei-inducible expression vector based on the lactose operon. The recombinant bacteria, transformed with the resulting construct (L. casei-HEP), were able to express the heterologous protein depending on the sugar added to the culture. Subcutaneous inoculation of L. casei-HEP in Balb/C mice, using the cholera toxin B subunit as adjuvant, induced systemic anti-HEP antibodies that were able to inhibit in vitro erythrocyte haemagglutination induced by FHA. This is the first example of a B. pertussis antigen produced in lactic acid bacteria and opens new perspectives for alternative vaccine strategies against whooping cough.