Estudo genotípico de seis cepas de Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) isoladas de exemplares de Rhodnius Montenegrensis, Triatoma Rubrovaria e Triatoma Sordida (hemiptera, reduviidae)

A doença de Chagas, causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, foi descrita pelo pesquisador brasileiro Carlos Chagas em 1909. É transmitida ao homem por insetos hemípteros conhecidos como barbeiros dos quais os gêneros mais importantes são Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma. Essa zoonose representa um risco para aproximadamente 20 milhões de pessoas em todo o mundo, principalmente na América Latina. Para tentar explicar as diferentes manifestações observadas na doença de Chagas, vários estudos foram realizados com intuito de averiguar as possíveis correlações entre as formas clínicas com a variabilidade genética do parasito. Algumas hipóteses estão relacionadas provavelmente ao fato de a doença ser um processo multifatorial, em que tanto aspectos do parasito como do hospedeiro estão inter-relacionados ou ainda a escolha inadequada de alvos como marcadores de patogenicidade na tentativa de estabelecer a correlação entre as formas clínicas e a variabilidade genética do parasito. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populações de T. cruzi, foi realizada a cinética de crescimento em meio LIT e o estudo genotípico de seis cepas de T. cruzi isoladas de exemplares de R. montenegrensis, T. rubrovaria e T. sordida por meio de marcadores genotípicos utilizando as sequência dos genes 24Sα do DNA ribossomal, HSP60 e GPI.

Estudo biológico, morfológico e molecular de duas cepas de Trypanosoma Cruzi (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) isoladas de exemplares de Triatoma Sordida e Triatoma Rubrovaria (Hemiptera, Reduviidae)

A doença de Chagas, conhecida também como tripanossomíase americana, foi descrita por Carlos Ribeiro Justiniano das Chagas em 1909 em Lassance, Minas Gerais. Ela é causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi e transmitido ao homem por insetos hemípteros conhecidos como barbeiros dos quais os gêneros mais importantes são Panstrongylus, Rhodinus e Triatoma. Essa zoonose atinge aproximadamente 10 milhões de pessoas em todo o mundo, principalmente na América Latina. Sabe-se que esse parasito apresenta grande variabilidade intraespecífica evidenciada por diferenças na patologia, virulência, constituição antigênica e habilidade de evasão à resposta imunológica e essa diversidade pode estar associada à sua adaptação e sobrevivência em diferentes hospedeiros. A diversidade patogênica, imunológica e morfológica inerente a esse flagelado dependem de fatores ainda indeterminados, como variação regional e individual da doença humana em infecções naturais e experimentais. Com o intuito de contribuir para ampliar o conhecimento sobre as populações de T. cruzi, propõe-se o estudo biológico, morfológico e molecular de duas cepas isoladas dos exemplares, Triatoma sordida (SI7) e Triatoma rubrovaria (QMM12) por Rosa et al. 2004; 2008 coletados nos Estados da Bahia e Rio Grande do Sul, respectivamente.

Sexual distinction between 5th instar nymphs of six species of Triatominae (Hemiptera, Reduviidae)

The aim of this paper is to present the analysis of sexual morphological differences observed in 5th instar nymphs of the following species: Panstrongylus megistus; Rhodnius neglectus; Triatoma brasiliensis; T. infestans; T. matogrosensis and T. tibiamaculata. Male and female nymphs were examined and photographed with a Scanning Electron Microscope. The 9th segment dimensions of dorsal and ventral faces were determined through a Profile Projector. Results and statistical analysis showed significant differences: the 9th sternite is significantly broader in male than female nymphs, while in five species; tergites in female nymphs are broad and in male are narrow.

Triatomíneos rupestres infectados por Trypanosomatidae, coletados em Quaraí, Rio Grande do Sul, 2003

Foram capturados triatomíneos rupestres em seis localidades do município de Quaraí-RS, com o intuito de verificar o índice de infecção por Trypanosomatidae, bem como o animal reservatório. A captura ocorreu no ambiente silvestre, sendo coletados 453 exemplares, os quais foram identificados e separados por estádio ninfal. Coletaram-se 421 (92,9%) exemplares de Triatoma rubrovaria, 26 (5,7%) de Triatoma circummaculata e 6 (1,3%) de Panstrongylus tupynambai. Dentre as três espécies coletadas, somente Triatoma rubrovaria mostrou-se positivo para Trypanosomatidae, num total de 13 (4,2%) exemplares. Após a inoculação em camundongos e meio de cultura LIT, isolaram-se cinco cepas de Trypanosoma cruzi. Dos triatomíneos infectados com Trypanosomatidae, 4 (30,8%) tiveram a reação de precipitina não reagente para os anti-soros testados, 4 (30,8%) positivos para anti-soro de roedor, 4 (30,8%) para anti-soro de cabra e 1 (7,7%) para anti-soro de porco e humano.

Acid phosphatase activity distribution in salivary glands of triatomines (Heteroptera, Reduviidae, Triatominae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Chromosomal location of heterochromatin and 45S rDNA sites in four South American triatomines (Heteroptera: Reduviidae)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Ultrastructural analysis of the nucleolar aspects at spermiogenesis in triatomines (Heteroptera, Triatominae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Chromatoid body: Remnants of nucleolar proteins during spermatogenesis in triatomine (Heteroptera, Triatominae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Study of the nucleolar cycle and ribosomal RNA distribution during meiosis in triatomines (Triatominae, Heteroptera)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Characterization of the external female genitalia of six species of Triatominae (Hemiptera: Reduviidade) by scanning electron microscopy

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Pattern of nucleolar activity during spermiogenesis in triatomines (Heteroptera, Reduviidae) as analysed by silver staining

Nucleoli are the sites of biosynthesis of ribosomal precursors. In this work the nucleolar activity at interphase and the meiotic cells of the testis in five species of triatomines were analysed by means of silver staining. Several nucleolar blocks in the polyploid nuclei of testicular tubules were observed, whereas only one nucleolar body could be seen in the spermatogonial nuclei of all five species. A single nucleolar body was evident in the 'confused stage' of Triatoma brasiliensis, T. delpontei, T. lecticularia and T. rubrovaria, while T. sordida presented two nucleolar dots. The existence of small, silver-stained dots in some metaphase I chromosomes of T. brasiliensis and T. sordida is reported. The number of nucleolar dots present in spermatids of each species varied within and among species. It is suggested that in addition to providing information on rRNA biosynthesis, studies of nucleolar organizing activity can also be important sources of data on differentiation patterns and species development.

Ribosomal DNA ITS-1 intergenic spacer polymorphism in triatomines (Triatominae, Heteroptera)

The length polymorphism of ribosomal DNA ITS-1 intergenic spacer was analyzed in eight species of triatomines belonging to Triatoma, Rhodnius, and Panstrongylus genera. The analyzed species were Rhodnius domesticus, R. neivai, R. robustus, Triatoma brasiliensis, T. infestans, T. vitticeps, Panstrongylus megistus, and P. herreri. These insects are vectors of Chagas' disease, one of the most prominent public health problems among South American countries. This work allowed the differentiation between species of the Triatomini and Rhodniini tribes through the analysis of ITS-1 length polymorphism by PCR and RFLP techniques. The species of the Triatoma and Panstrongylus genera presented an amplified ITS-1 fragment between 600 and 1000 bp, whereas Rhodnius presented a less variable ITS-1 length fragment, around 300 bp, which could reflect the monophyletic origin of the Rhodniini tribe. Species belonging to this genus were further differentiated by RFLP with HaeIII and AluI endonucleases. Our results corroborate the hypothesis of polyphyletic origin in this group of insects and contribute to knowledge about evolutionary relationships in triatomines.

SEXUAL DISTINCTION BETWEEN 5TH INSTAR NYMPHS OF 6 SPECIES OF TRIATOMINAE (HEMIPTERA, REDUVIIDAE)

The aim of this paper is to present the analysis of sexual morphological differences observed in 5th instar nymphs of the following species: Panstrongylus megistus; Rhodnius neglectus; Triatoma brasiliensis; T. infestans; T. matogrossensis and T. tibiamaculata. Male and female nymphs were examined and photographed with a Scanning Electron Microscope. The 9th segment dimensions of dorsal and ventral faces were determined through a Profile Projector. Results and statistical analysis showed significant differences: the 9th sternite is significantly broader in male than in female nymphs, while in five species, tergites in female nymphs are broad and in male are narrow.

Cytogenetic studies on holocentric chromosomes of five species of triatomines (Heteroptera: Reduviidae)

The chromosome number and meiotic cycle of triatomines were investigated. All five species presented the same diploid chromosome number, 2n = 22 (20A + XY in the male). Phylogenetic relationships based on chromosomal evidence and C-banded karyotypes in the subfamily are discussed. It is suggested that differences in DNA content are mainly due to variations in the amount of C-heterochromatin, which may be interpreted as loss and/or gain of C-regions. This interpretation is supported by the presence of meiotic and mitotic chromocentres which facilitate the transfer of C-positive material.

Comparative phylogeography of Trypanosoma cruzi TCIIc: New hosts, association with terrestrial ecotopes, and spatial clustering

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)