IL-2基因的突变及其与肠毒素融合基因的克隆和表达

由金黄色葡萄球菌分泌到胞外的单亚基蛋白中有肠毒素A和B。近年来两种毒素在肿瘤治疗研究方面取得了很大进展。白介素-2作为靶向分子，在抗肿瘤的药物中很有应用前景。本文分别对肠毒素A、肠毒素B和白介素-2进行了克隆和表达，并将白介素-2（125Ala）分别与肠毒素A227AI。肠毒素B进行了融合表达。从筛选到的天然金黄色葡萄球菌STSw的基因组中，通过PCR方法扩增出seb基因，同时突变了该基因两端几个稀有密码子。并将其克隆到7ZTS载体上进行表达，表达量占细胞总蛋白的33.5％。以seam基因为模板，通过重叠PCR将其227位天冬氨酸突变为丙氨酸，以降低其毒性。该突变基因重组到7ZTS载体中，并在JM109（DE3）中表达，表达量占细胞总蛋白的51.5％。通过重叠PCR法，对人的IL-2基因进行定点突变。共突变60个碱基，涉及51个氨基酸，其中第125位的半肤氨酸被突变为丙氨酸。该基因在大肠杆菌中表达量占总蛋白的30％。分别对上述三个工程菌的表达条件进行了探索。先制备出融合基因，再对融合基因进行表达，得到两种融合蛋白。它们是以6个甘氨酸和1个苏氨酸为链，将IL一2（125Ala）与肠毒素A227（Ala）、B分别连接起来，即IL-2（125Ala）-SEA227（Ala）和IL-2（125Ala）-SEB二者在大肠杆菌中表达量分别占总蛋白的10％和12％。以上实验结果为将几种蛋白开发成抗肿瘤靶向药物奠定了坚实基础。

IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达

目的 :IL - 2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达。方法 :分别在金黄色葡萄球菌肠毒素A2 2 7Ala、B基因的两端克隆上两个酶切位点HindⅢ ,KpnⅠ。将IL - 2基因突变 ,设计一段linker使之分别与SEA2 2 7Ala和SEB相连并克隆到PET表达载体中 ,在大肠杆菌DH5α(DE3) -Pass中表达。结果 :表达的蛋白占总蛋白 15 %。结论 :IL - 2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合蛋白能在大肠杆菌中有效表达

Structural Evolution and Property Changes in Nd_{60}Al_{10}Fe_{20}Co_{10} Bulk Metallic Glass During Crystallization

The structural evolution and property changes in Nd60Al10Fe20Co10 bulk metallic glass (BMG) upon crystallization are investigated by the ultrasonic method, x-ray diffraction, density measurement, and differential scanning calorimetry. The elastic constants and Debye temperature of the BMG are obtained as a function of annealing temperature. Anomalous changes in ultrasonic velocities, elastic constants, and density are observed between 600–750 K, corresponding to the formation of metastable phases as an intermediate product in the crystallization process. The changes in acoustic velocities, elastic constants, density, and Debye temperature of the BMG relative to its fully crystallized state are much smaller, compared with those of other known BMGs, the differences being attributed to the microstructural feature of the BMG.

Nd_(60)Al_(10)Fe_(20)Co_(10)金属玻璃的变形行为

利用材料测试系统(MTS)、X-Ray 衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)等手段研究了Nd 基大块金属玻璃的变形行为和断裂特征。Nd 基大块金属玻璃样品在室温下是脆性断裂,大约在500 K 时变形模式从非均匀变形转变为均匀变形,在523 K 以上表现出显著的塑性变形。在5×10-4 m/s 的应变速率下,这种Nd 基大块金属玻璃材料在523 K~600 K 之间出现明显的屈服应力下降现象,随后进入1 种稳定的粘性流动状态,而且这种屈服下降现象与温度和应变速率有关。这种在过冷液相区的变形行为与其他大块金属玻璃变形特征相似。合金的这种塑性变形行为表明了其存在稳定的过冷液相区,同时对其变形行为的研究有助于进一步了解Nd 基大块金属玻璃的反常热稳定性。

20～21世纪的力学

<正> 一、力学发展的趋势 1.20世纪力学的巨大成就 本世纪初边界层理论的提出,对力学的发展起了划时代的作用。从此,流体力学能够成功地解释流动对物体的阻力与升力,为航空、航天的发展奠定了科学基础。这个典型也影响与推动了其他力学分支的发展,使力学研究的内涵有了空前的充实、扩大与深化。早在20年代初便形成了活跃于整个20世纪内容广泛的应用力学,成为工程与应用科学的支柱。人们把空气动力学的研究看作是本世纪以科学为基础将航

加卸载响应比20年及其展望

地震孕育过程是一个非线性、不可逆的过程,震源区介质的加载响应不同于卸载响应,这种加载响应与卸载响应的差别可以定量地刻画地震的孕育过程。基于这个物理概念,提出了一个新的参数加卸载响应比,作为一类地震前兆,用来定量预测强震的发生。在本文中,首先简单回顾了加卸载响应比的发展历史,然后详细介绍了地震震例检验、数值计算、实验研究、地震预测精度、可信度等方面的内容,最后对加卸载响应比的前景进行了展望。

当代的力学热点——由介绍第20届国际理论和应用力学大会引起的思考

本文通过介绍第２０ 届国际理论和应用力学大会的概况，分析了当代力学发展的现状和热点，并由此提出了对我国力学发展的思考和构想。

微重力落管法制备Nd_(60)Al_(10)Fe_(20)Co_(10)非晶薄片的磁性能研究

采用微重力落管法制得了Nd6 0 Al1 0 Fe2 0 Co1 0 非晶薄片 .利用X衍射 (XRD)分析了Nd6 0 Al1 0 Fe2 0 Co1 0 非晶薄片的结构特征 .用振动样品磁强计 (VSM)研究了其磁性能 .结果表明微重力落管法制得的非晶薄片具有硬磁性 ,与快速非平衡凝固(如甩带法 )试样的XRD相比 ,尽管其曲线还是较为典型的非晶相漫散衍射峰 ,但已有少量的不规则的类似晶化的突起小峰 ,表明该非晶片中已经有微量晶态合金或者细小晶粒析出 ,初步分析可能是生成了类似于亚稳A1 相的短程有序原子团簇或者是较大尺寸的纳米晶 ,这种短程有序原子团簇或纳米晶是Nd6 0 Al1 0 Fe2 0 Co1 0 非晶薄片显示硬磁性的主要原因

Nd_(60)Al_(10)Fe_(20)Co_(10)大块金属玻璃的玻璃转变和晶化过程

本文利用DSC、X射线衍射和动态力学分析以及扫描电子显微镜研究了Nd_(60)Al_(10)Fe_(20)Co_(10)大块金属玻璃(BMG)的玻璃转变和晶化过程。结果表明,合金的动态力学分析结果清楚地反映出材料的玻璃转变和晶化过程。由此确定材料的玻璃转变温度为493K,初始晶化温度为590K。X射线衍射和组织分析表明合金的晶化过程为:非晶α→非晶α’+未知亚稳NdFeAl相→非晶α’+初晶δ相→初晶δ相+共晶δ相+Nd_3Co+Nd_3Al。

IL-8-induced L-selectin shedding regulates its binding kinetics to PSGL-1

L-selectin plays a crucial role in inflammation cascade by initiating the tethering and rolling of leukocytes on endothelium wall. While many L-selectin molecules are rapidly shed from the cell surface upon activation, the remaining membrane-anchored L-selectin may still play an important role in regulating leukocyte rolling and adhesion with different binding kinetics. Here we developed an in vitro model to activate Jurkat cells via interlukin-8 (IL-8) and quantified the two-dimensional (2D) binding kinetics, using a micropipette aspiration assay, of membrane-anchored L-selectin to P-selectin glycoprotein ligand 1 (PSGL-1) ligand coupled onto human red blood cells (RBCs). The data indicated that L-selectin shedding reduced the amount of membrane-anchored L-selectin and lowered both its reverse and forward rates. These results suggested that the rolling dynamics of activated leukocytes was determined by two opposite impacts: reducing the surface presentation would enhance the rolling but lowering the kinetic rates would decrease the rolling. This finding provides a new insight into understanding how L-selectin shedding regulates leukocyte rolling and adhesion.

IL-8刺激L-选择素水解断裂对细胞膜拓扑结构和刚度的影响

目的 研究IL-8刺激所致的L-选择素水解断裂是否会引起细胞膜结构和刚度的变化,进而影响L广选择素-配体的反应动力学.方法 分别用IL-8、TAPI-0+IL-8和TAPI-0处理本构表达L-选择素的Jurkat细胞,用以构建L-选择素水解断裂、阻断水解断裂和阻断剂对照的细胞-分子模型.采用扫描电镜观察其表面拓扑结构,采用微管吸吮方法测量其刚度.结果 与正常组相比,水解断裂组和阻断水解断裂组细胞微绒毛减少、表面趋于光滑,而阻断剂对照组则无明显变化;无论是水解断裂组,阻断水解断裂组还是阻断剂对照组,细胞膜刚度与正常组相比均无显著性差异.结论 IL-8刺激所致L-选择素水解断裂会引发细胞膜拓扑结构的变化,进而影响L一选择素一配体反应动力学的变化;而细胞膜刚度未见明显变化,表明载体刚度不是水解断裂引发L-选择素-配体反应动力学变化的因索.

High-energy ion emission from cooled deuterium clusters in 20 TW laser fields

High-energy ion emission from intense-ultrashort (30fs) laser-pulse- cooled deuterium-cluster (80K) interaction is measured. The deuterium ions have an average energy 20keV, which greatly exceeds Zweiback's expectation [Phys. Rev. Lett. 84 (2000) 2634]. These fast deuterium ions can be used to drive fusion and have a broad prospect.

Characteristics of 980/1550 nm WDM coupler based on planar curved waveguides

A wavelength division multiplexer (WDM) for 980/1550 nm based on planar curved waveguide coupler (CWC) is proposed. Compared with conventional parallel straight waveguide coupler (SWC), this structure has more flexibility with two variable parameters of bending radius R and minimum edge-to-edge spacing do, which are the two main parameters for the splitting ratio of coupler and decrease the complexity of device design and fabrication. Based on coupled mode theory (CMT) and waveguide theory, R and do of the WDM CWC are designed to be R = 13.28 m and d(0) = 4.39 mu m. The contrast ratio (CR) and insertion loss (IL) for 980 and 1550 nm are CR1 = 24.62 dB, CR2 = 24.56 dB and IL1 = 0.014 dB, IL2 = 0.015 dB, respectively. The 3D beam propagation method (BPM) is used to verify the validity of the design result. The influence of R and d(0) variations on the device performance is analyzed. For CR > 20 dB, the variation ranges of R and d(0) should be within -0.10 to +0.44 m and -0.05 to + 0.02 mu m, respectively. (c) 2006 Elsevier GmbH. All rights reserved.