Ação da metilprednisolona no sistema nervoso central de roedores: viabilidade celular e envolvimento com memória


Autoria(s): Ogata, Barbara Akemi Basto
Contribuinte(s)

Vinadé, Lúcia Helena do Canto

Dal Belo, Cháriston André

Data(s)

12/09/2017

12/09/2017

21/06/2017

Resumo

Methylprednisolone (METP) is a synthetic glucocorticoid that has widespread and worldwide use in the clinical area. In addition to anti-inflammatory and immunological activity, glucocorticoids are also known to interfere in memory consolidation processes, but little is known about its mechanisms. Recently, glucocorticoid METP has been shown to induce a positive modulation of rodents neuromuscular transmission, which results in increased calcium influx at end plates. Knowing this, we propose that some mechanisms related to calcium-dependent signaling pathways may be involved also in the mnemonic response of glucocorticoids. The aim of this work was to investigate the effects of METP on cell viability and on cellular signaling element involved in memory, the calcium and calmodulin dependent protein kinase type II - CaMKII, in the central nervous system of rodents. The cell viability of cerebral slices treated with doses of 3, 30 and 300 μM METP was assayed using the MTT colorimetric test and the glucose and oxygen deprivation model (PGO). As for in vivo assays, hippocampal and cortex structures from rats treated with 5 mg/kg and 30 mg/kg of METP were subjected to 10% SDS-PAGE and Western blot technique. Results were analyzed by the ImageJ software (NIH). The use of animals was previously approved by the Committee on Ethics in Animal Use (CEUA / UNIPAMPA 037/2012). The results demonstrated an increase in the electrophoretic density and immunocontent of CaMKII in cortex in vivo METP treatment. In cortex and hippocampal slices, in vitro METP treatment, provided an increase in cell viability, but not related to neuroprotection, at least to ischemic events provided by glucose and oxygen deprivation. The data presented in this work suggest that memory enhancement induced by low dose METP treatment involves the calcium dependent signaling pathway of CaMKII.

A Metilprednisolona (METP) é um fármaco sintético da classe dos glicocorticoides que tem utilização mundial generalizada na área clínica. Além da atividade anti-inflamatória e imunológica, os glicocorticoides são também conhecidos por interferirem nos processos de consolidação da memória, porém pouco é conhecido sobre os mecanismos. Recentemente, foi demonstrado que o glicocorticoide METP induz uma modulação positiva da transmissão neuromuscular de roedores, a qual resulta em aumento do influxo de cálcio em placas terminais. Sabendo disso, propomos que os mesmos mecanismos relacionados com as vias de sinalização dependentes de cálcio podem estar envolvidos na resposta mnemônica dos glicocorticoides. Portanto, este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos da METP sobre a viabilidade celular e sobre um elemento de sinalização celular envolvido na memória, a proteína quinase dependente de cálcio e calmodulina do tipo II - CaMKII, no sistema nervoso central de roedores. Neste trabalho, a viabilidade celular de fatias cerebrais tratadas com doses de 3, 30 e 300 μM de METP, foi ensaiada utilizando o teste colorimétrico MTT e o modelo de privação de glicose e oxigênio (PGO). Quanto aos ensaios in vivo, as estruturas hipocampo e córtex de ratos tratados com 5mg/kg e 30 mg/kg de METP foram submetidas a SDS-PAGE a 10% e a técnica de western blot. Os resultados foram analisados pelo software ImageJ (NIH). O uso de animais foi previamente aprovado pela Comissão de Ética em Uso Animal (CEUA / UNIPAMPA 037/2012). Os resultados, demonstraram um aumento da densidade eletroforética e do imunoconteúdo da CaMKII em córtex, com o tratamento in vivo com METP. Em fatias de córtex e hipocampo, METP in vitro proporcionou um aumento da viabilidade celular, porém não relacionado com neuroproteção a eventos isquêmicos proporcionados pela privação de glicose e oxigênio. Os dados apresentados neste trabalho sugerem que o aumento da memória induzido pelo tratamento com doses baixas de METP está envolvido com a via de sinalização dependente de cálcio da CaMKII.

Identificador

http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/1847

Idioma(s)

por

Publicador

Universidade Federal do Pampa

UNIPAMPA

Brasil

Campus São Gabriel

Direitos

Acesso Aberto

Palavras-Chave #CaMKII #Glicocorticóide #Glucocorticoid #Cálcio #Calcium #CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS #CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MORFOLOGIA::CITOLOGIA E BIOLOGIA CELULAR
Tipo

Trabalho de Conclusão de Curso