Charakterisierung von T-Zell-Antworten gegen humane Nierenzellkarzinome sowie Identifizierung von HLA-G als tumorassoziiertes Antigen und Immunevasionsmechanismus des Nierenzellkarzinoms

Humane Nierenzellkarzinom-(NZK)-Zelllinien wurden etabliert, um sie zur Generierung von autologen zytotoxischen T-Zelllinien einzusetzen. Erst nach Modifikation mit dem kostimulierenden B7-1-Molekül wurden mit der NZK-Zelllinie MZ1257RC autologe, tumorspezifische T-Zelllinien generiert und charakterisiert. Die Aufklärung eines T-Zell-definierten TAA eines autologen, zytotoxischen T Zellklons wurde mittels Expressionsklonierung einer hergestellten cDNS-Expressionsbank begonnen. Nach in vitro-Sensibilisierung von peripheren Blutmonozyten mit der autologen NZK-Zelllinie MZ2733RC wurde die HLA-Klasse I-restringierte T Zelllinie XIE6 generiert, die die autologe und verschiedene allogene NZK- sowie Zervixkarzinom-Zelllinien, jedoch nicht autologe Nierenzellen lysiert. Die T Zellen exprimieren TZR Vβ13.6-Ketten und sezernieren GM-CSF und IL-10 nach Antigenstimulation. Jedoch ist die NZK-Zelllinie MZ2733RC wenig sensitiv gegenüber autologen und allogenen Effektorzellen. Erst die Blockade ihrer HLA Klasse I-Moleküle auf der Zelloberfläche erhöht ihre Sensitivität gegenüber allogenen lymphokin-aktivierten Killer-Zellen. Verantwortlich dafür können nicht-klassische HLA Klasse Ib-Moleküle, insbesondere HLA-G sein, dessen Transkripte in der RNS der NZK-Zellen, jedoch nicht in Nierenzellen detektiert wurden. In einer detaillierten Studie wurden HLA-G-Transkripte in NZK-Zelllinien (58%), in NZK-Biopsien (80%), und nur in wenigen Nierenepithelbiopsien (10%) nachgewiesen. In der NZK-Zelllinie MZ2733RC wurde eine konstitutive HLA-G1-Proteinexpression beobachtet, die durch eine IFN-γ-Behandlung induzierbar ist.

Renal cell carcinoma (RCC) cell lines were established to generate autologous T-cell lines. With the RCC cell line MZ1257RC modified to express the costimulatory molecule B7-1 at the cell surface, different autologous T-cell lines were raised and characterized. The Identification of a tumor associated antigen was started using an autologous, HLA-A2 restricted T-cell clone in cDNA expression cloning. After in vitro-sensitization of peripheral blood monocytes with the autologous RCC cell line MZ2733RC, a HLA class I restricted T-cell line XIE6 was raised, which lyses the autologous and various allogeneic RCC cell lines, but not the autologous kidney cells. The T-cells express TZR-Vβ13.6-chains and release GM-CSF and IL-10 after antigen stimulation. Although this RCC cell line is less sensitive towards autologous and allogeneic effector cells. Finally, blocking of its HLA class I molecules on the cell surface enhances its sensitivity to lymphokine activated killer cells. A reason for this may be the expression of non-classical HLA class Ib molecules, especially HLA-G. Seven different HLA-G transcripts were detected in RNA from carcinoma cell lines, but not from kidney cells. In a detailed analysis, HLA-G transcripts were found in RCC cell lines (58%), in RCC biopsies (80%) and only in 10% of kidney epithelium biopsies. In the RCC cell line MZ2733RC a constitutive HLA-G1 protein expression was observed, which is inducible by IFN-γ-treatment.