Estudo preliminar- descalcificação de tecido ósseo de origem animal em micro-ondas

A análise histopatológica de tecido ósseo exige uma etapa de descalcificação. O método usual consiste na imersão das amostras em ácidos, mas para além de provocarem danos tecidulares, o processo é prolongado. A utilização de micro-ondas acelera a descalcificação, mas não deve comprometer a imagem microscópica. Objetivo: Diminuir a duração da descalcificação, mantendo a qualidade da imagem microscópica. Metodologia: Foram testadas amostras de osso compacto e esponjoso. Realizou-se a descalcificação pelo método convencional e pelo método em micro-ondas, através da adaptação de um protocolo conhecido. Utilizou-se ácido nítrico a 5% e 10%. Resultados: Nos fragmentos de maiores dimensões, após 4 horas com ácido nítrico a 10% em micro-ondas, não se conseguiu uma descalcificação completa, apesar da imagem histológica ser razoável. Nos fragmentos de osso esponjoso, verificou-se uma redução de cerca de 25 horas relativamente ao método convencional. Nas biópsias, houve uma redução de aproximadamente 10 horas, utilizando ácido nítrico a 5%. Com ácido nítrico a 10% houve destruição tecidular. Nos casos em que se obteve uma descalcificação completa, a imagem microscópica apresenta fraca qualidade. Conclusão: A utilização de micro-ondas com ácido nítrico a 5%/10%, aplicando o protocolo deste estudo, reduz a duração da descalcificação, mas compromete a imagem microscópica.

Histological analysis of bone tissue requires a decalcification process. The most common method consists on sample’s immersion in acidic solutions. However, it causes tissue damage and is time consuming, delaying the diagnosis. The use of microwaves accelerates the decalcification process, but shouldn’t compromise the histological image. Objective: Reduce the decalcification time, maintaining the quality of the histological image. Methodology: Compact and spongy bone were used. Decalcification was performed by conventional method and microwave method with an adaptation of a known protocol, using 5% and 10% nitric acid. Results: For larger fragments, after 4 hours of microwave decalcification with 10% nitric acid, the process was incomplete for compact bone, in spite of moderate quality of histological image. In the fragments of spongy bone, there was a reduction of approximately 25 hours, comparing with conventional method. In biopsies, there was a reduction of approximately 10 hours using 5% nitric acid. With 10% nitric acid, there was tissue destruction. The cases with complete decalcification had a poor quality of the histological image. Conclusion: The use of microwave decalcification with 5%/10% nitric acid, applying the protocol of this study, reduces the process time but compromises the histological image.