Desenvolvimento de Métodos de Extração de Resíduos de Antimicrobianos e Quantificação em Amostras Alimentares

O leite é um alimento complexo, pela sua composição rico em água, proteínas, lípidos, vitaminas e minerais. Devido ao seu alto valor nutricional é fundamental para a amamentação de crianças e animais em crescimento, pois fornece componentes fundamentais para o desenvolvimento e manutenção da saúde. Os antimicrobianos são amplamente utilizados como uma medida terapêutica no tratamento de infeções bacterianas, profilaxia e como promotores de crescimento (aditivos). A presença de resíduos de antimicrobianos no leite pode representar riscos para a saúde humana, como reações alérgicas em indivíduos hipersensíveis e resistências. Os objetivos deste estudo são o desenvolvimento de novos métodos de limpeza e de pré-concentração para amostras de leite, por meio de extração em fase sólida (SPE), com a finalidade de realizar uma melhor identificação e quantificação de antimicrobiana por Cromatografia Líquida de Alta Performance (HPLC). Todos os métodos desenvolvidos são de fácil execução, com taxas de recuperação dos agentes antimicrobianos viáveis, com uma percentagem de recuperação a partir de 85%. O método cromatográfico utilizado para a deteção e quantificação (HPLC-DAD) têm os limites de deteção (LD) entre 2.43ng / mL e 1.62ng / mL e os limites de quantificação (LQ) entre 7,36 ng / mL e 4.92 ng / mL, o que significa este método vai de encontro às diretrizes estipuladas pela União Europeia para os agentes antimicrobianos estudados. A combinação dos métodos propostos de limpeza e pré-concentração por SPE e multirresíduo por HPLC-DAD permite, por conseguinte, a deteção e quantificação de resíduos de antibióticos no leite, tornando esta uma alternativa importante e útil no processo de controlo de qualidade para a indústria de alimentos e outras área.

Milk as a complex food has water in its composition, proteins, lipids, vitamins and minerals. Due to its high nutritional value is a key to breastfeeding, children and animals growing, because it provides fundamental components for development and maintenance of health. Antimicrobial are widely used as a therapeutic measure in the treatment of bacterial infections, disease prophylaxis and as a growth promoter (food additives). The presence of antimicrobial residues in milk may represent risks for human health, namely allergic reactions on hypersensitive individuals, or even cause problems indirectly by development of resistant strains of bacteria. The aims of the study is a development of new clean-up and preconcentration methods for milk samples, through a solid-phase extraction (SPE), in order to perform a better identification and quantification of antimicrobial by High-Performance Liquid Chromatography (HPLC). All developed methods showed ease of execution and recovery rates, for antimicrobial agents used and percentage of viable recovery up from 85%. The chromatographic method used for the detection and quantification (HPLC-DAD) have the limits of detection (LD) of 2.43ng / mL and 162ng / mL and limits of quantification (LQ) of 7.36 ng / ml and 492 ng / mL, which means this method meets the guidelines stipulated by the European Union for antimicrobial studied. The combination of the proposed methods of clean-up and pre- concentration by SPE and multirresidue HPLC-DAD allows, therefore, the detection and quantification of antimicrobial residues in milk, making this an important and useful alternative in quality control process for the food industry and other.