The role of AmotL2 in organ formation and tumorigenesis

Tese de mestrado, Oncobiologia, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014

O estabelecimento e manutenção de propriedades como a polaridade e a estrutura celular, são essenciais para o correcto funcionamento de tecidos epiteliais. Estudos anteriores demonstraram que a expressão de uma das isoformas da proteína Amotl2, nomeadamente a isoforma p60, está correlacionada com a perda destas propriedades em tumores de pacientes de cancro do cólon e da mama. Neste estudo, demonstramos as alterações no fenótipo de células epiteliais, causadas pela expressão ou pelo knockdown das duas isoformas de Amotl2, p60 e p100. O nosso estudo demonstra um efeito antagónico por parte das duas isoformas, sendo que células que possuem um knockdown de Amotl2 p100 apresentam um fenótipo semelhante ao de células que expressam Amotl2 p60, nomeadamente um aumento da superfície celular e a perda de fibras de actina. Também comparamos neste estudo o efeito de remoção e re-adição de cálcio em células epiteliais wild-type e Amotl2 p100 KD. Por fim, demonstramos que a expressão de Amotl2 p60 em células epiteliais leva a um aumento da formação de extensões celulares, possivelmente indicando uma maior capacidade de mobilidade por parte destas células.

The establishment and maintenance of apical-basal cell polarity, as well as proper cellular shape, is essential for the functionality of epithelial tissues. Previous studies demonstrate that the expression of the p60 isoform of the protein Amotl2 correlates with a loss of tissue architecture in colon and breast cancer patients. In this study we demonstrate the phenotypic changes in epithelial cells caused by the expression and knockdown of the two Amotl2 isoforms, namely p60 and p100. Our study demonstrates an antagonic effect of the two isoforms, where p100 KD and p60 expression seem to have similar consequences in cellular shape and in the loss of actin stress fibers. We also compare the effect of calcium depletion and readdition in Amotl2 p100 KD cells and wild-type cells. Finally we demonstrate that p60 Amotl2 expression, in epithelial cells, ultimately leads to an increase in the formation of cell extensions, possibly indicating a greater mobility in these cells.