Expressão e distribuição de CGRP, VEGF e TGF-β na gengiva dos dentes de ratos com periodontite induzida por ligadura: aspectos imunohistoquímicos

No momento em que há a agressão tecidual e a defesa inata é deflagrada, mediadores químicos são liberados no local afetado. Esses mediadores podem ser de origem celular tais como CGRP, VEGF e TGFß. Os objetivos desta pesquisa foram avaliar a expressão e distribuição de CGRP, TGFß e VEGF na gengiva do primeiro molar inferior esquerdo de rato no 7 e 14 dias após a indução por ligadura; a expressão e distribuição de CGRP, TGFß e VEGF na gengiva do dente contralateral correspondente sem ligadura, no 7 e 14 dias, e se a indução da periodontite por ligadura no dente experimental provoca uma inflamação na gengiva do dente contralateral correspondente no 7 e 14 dias após a ligadura. Para o desenvolvimento deste trabalho foram selecionados 15 ratos Rattus Novergicus, Albinus, Wistar. O grupo experimental de 12 ratos foi dividido em 2 subgrupos compostos por 6 ratos cada um deles distribuídos da seguinte maneira: os do subgrupo A1 permaneceram com a ligadura no primeiro molar inferior esquerdo por 7 dias e foram sacrificados; os do subgrupo A-2 -permaneceram com a ligadura no primeiro molar inferior esquerdo por 14 dias e foram sacrificados. Outros três animais constituíram o grupo controle. Após o sacrifício dos 12 animais dos grupos experimentais e controle suas mandíbulas foram colocadas em ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) neutro para sofrerem descalcificação. Então foram processadas para inclusão em parafina e os cortes histológicos foram corados pela hematoxilina-eosina e submetidos à técnica imunohistoquímica para imunomarcação de CGRP, VEGF e TGFß. Aos 7 dias de ligadura observou-se na lâmina própria gengival, epitélio juncional e epitélio oral, expressiva marcação para CGRP. A expressão de VEGF foi intensa na lamina própria e com pouca ou nenhuma marcação no epitélio oral e juncional. O TGFß apresentou pouca marcação na lâmina própria ou nenhuma marcação no epitélio oral e juncional. Aos 14 dias de ligadura houve expressiva marcação de CGRP na lâmina própria, epitélios oral e juncional. O VEGF e o TGFß apresentaram muita marcação na lâmina própria e pouca ou nenhuma marcação no epitélio oral e juncional. Na gengiva dos dentes contralaterais nos 7 e 14 dias houve pouca marcação do CGRP do TGFß na lâmina própria e muita marcação do VEGF. Na gengiva dos dentes controle observou-se muita marcação do CGRP no epitélio juncional e oral e na lâmina própria. O TGFß e o VEGF se expressaram muito pouco ou não se expressaram. Devido à marcação expressiva do VEGF na lâmina própria dos dentes contralaterais, permanece inconclusiva a adequação do uso dos dentes contralaterais nos estudos experimentais das doenças periodontais, embora a expressão de TGFß e CGRP tenham sido menores nestes dentes. A maior marcação do CGRP, VEGF e TGFß nos animais com 14 dias de ligadura do que aos 7 dias demonstra a progressão do processo inflamatório crônico, não se observando processo de reparação cicatricial.

At the time of the tissue aggression the innate defense is triggered and the chemical mediators are released in the affected site. These mediators may have cell origin as the CGRP, VEGF and TGFß. The aim of this research were to evaluate the expression and distribution of the CGRP, VEGF and TGFß in the gingiva of the lower left first molar of rats in the seven and fourteen days after the ligature for inflammation induction; to analyse the expression and distribution of the CGRP, VEGF and TGFß in the gingiva of the correspondent counter lateral tooth without ligature in the seven and fourteen days and if the induction of periodontitis causes gingival inflammation of the counter lateral tooth after seven and fourteen days after ligature. For the development of this work were selected fifteen Rattus Novergicus, Albinus,Wistar. The experimental group of 12 rats was divided into 2 groups consisting of 6 rats each distributed of the following manner: the subgroup A1 remained with ligature in the first molar and left for 7 days before the sacrificed and the subgroup A-2 remained with the ligature for 14 days before the sacrificed. Another 3 animals constituted the control group. After the sacrificed of the 12 experimental and 3 control animals were immersedin neutral ethylenidiaminetetracetic (EDTA) for the decalcification. Then were processed for paraffin embedding. The sections were stained with hematoxylin-eosin and submitted to immunohistochemical techniques to imunostaining for CGRP, VEGF and TGFß. At 7 days of ligature was observed in the gingival lamina propria, junctional epithelium and oral epithelium, strong staining for CGRP. The intensive expression of VEGF occur in the lamina propria and scarce or no staining in the oral and junctional epithelium. The TGFß shows scarce staining in the lamina propria and no staining in the oral and junctional epithelium. At the fourteen days of ligature we observed strong staining of CGRP in the lamina propria and oral and junctional epithelium. The VEGF and TGFß show strong staining in the lamina propria and scarce or no staining in the junctional and oral epithelium. At the gingival of the counterlateral teeth in the 7 and 14 days there was scarce staining for CGRP and TGFß in the lamina propria and strong staining to VEGF. In the gingival of couterlateral teeth there was strong staining to CGRP in the junctional and oral epithelium and lamina propria. The TGFß and VEGF show scarce or none staining. Because the strong staining of VEGF in the lamina propria of the counterlateral teeth remain inconclusive the adequacy of the use of the counterlateral teeth in the experimental studies of the periodontal diseases, though the expression of the TGFß and CGRP has been smaller in this teeth. The bigger staining of CGRP, VEGF and TGFß in the animals with 14 days of ligature than those 7 days shows the evolution of the chronic inflammation process. We dont observe the process of tissue healing.